Назначение ИФА для диагностики заражения на гельминтоз, суть метода

Лабораторная диагностика гельминтозов и паразитозов

Комплексное лабораторное обследование для выявления основных гельминтозов и протозойных инфекций человека, включающее общеклинические и специфические тесты.

Анализы для диагностики гельминтозов и протозойных инфекций.

Синонимы английские

Laboratory diagnosis of protozoal and helminthic infections; CBC, Stool Ova and Parasites test, Cellulose tape test, Protozoal and Helminthic Serology.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал, отпечаток с перианальной области.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
  • Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
  • Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.
  • Сбор биоматериала на исследование проводится только утром (до 10:00), до дефекации. Накануне взятия биоматериала не проводить туалет кожных покровов в области ануса и ягодиц.

Общая информация об исследовании

Гельминтозы и протозойные инфекции наблюдаются повсеместно и особенно распространены среди детей и людей, по роду деятельности контактирующих с домашними и дикими животными. Как правило, инфицирование человека является одним из этапов развития гельминтов или простейших. Многие из паразитов имеют фекально-оральный механизм передачи инфекции и по крайней мере на одном этапе жизненного цикла поражают различные отделы пищеварительного тракта. Несмотря на то что некоторые гельминтозы и паразитозы человека имеют специфические клинические признаки, в целом дифференцировать эти заболевания на основании клинической картины очень сложно. Основную роль в диагностике этих заболеваний играют лабораторные тесты. С учетом того, что у одного и того же человека может наблюдаться сочетание нескольких гельминтозов и паразитозов, рекомендуется выполнение сразу нескольких тестов или, что более удобно для врача и пациента, комплексного анализа на распространенные гельминтозы и паразитозы.

Комплексное лабораторное обследование включает общеклинические и специфические анализы на самые распространенные и важные в клиническом плане гельминтозы и протозойные инфекции. Общеклинические тесты: общий анализ крови, лейкоцитарная формула, анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших.

Общий анализ крови и лейкоцитарная формула используются для того, чтобы определить, является ли гельминтоз или паразитоз инвазивным, и также позволяет выявить возможные осложнения, связанные с инфекцией (анемию). Об инвазивности гельминтозов и паразитозов свидетельствует эозинофилия. Она характерна для амебиаза, эхинококкоза, описторхоза, токсокароза, трихинеллеза и аскаридоза (в фазу миграции личинок). Эозинофилия не характерна для кишечного аскаридоза, энтеробиоза и лямблиоза. Любая длительно текущая инфекция может приводить к развитию анемии (анемии хронического заболевания). Гельминтозы и паразитозы, протекающие с изъязвлением слизистой оболочки пищеварительного тракта (например, амебиаз), приводят к развитию железодефицитной анемии.

Анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших включают макроскопическую оценку кала (цвет, консистенция, наличие крови, избытка слизи, макроскопически определяемых паразитов), микроскопию нативного образца кала (наличие цист простейших – трофозоитов, личинок и взрослых особей гельминтов) и микроскопию окрашенного мазка кала (наличие цист и трофозоитов). Анализ кала на яйца гельминтов позволяет выявить большинство кишечных нематод, цестод и трематод. Анализ кала на цисты простейших позволяет выявить Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Balantidium coli и других простейших. Учитывая, что поступление яиц гельминтов или цист простейших в кал может носить непостоянный характер, однократное исследование кала малоинформативно – рекомендуется исследование трех образцов кала. Следует учитывать, что при некоторых гельминтозах (например, описторхоз) появление яиц в кале начинается только через 2-4 недели после возникновения симптомов заболевания. Отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

К специфическим тестам для диагностики гельминтозов и паразитозов относятся серологические тесты и анализ на энтеробоз.

Echinococcus, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю эхинококкоза (Echinococcus granulosus или Echinococcus multilocularis). Чувствительность серологических тестов в отношении E. granulosus при поражении печени (самая частая локализация) составляет около 80 %, при поражении других органов (легкие, головной мозг, кости скелета) – несколько ниже.

Opistorchis, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю описторхоза (Opistorchis felineus или Opistorchis viverrini). Из-за невысокой специфичности серологические тесты являются дополнительным способом диагностики описторхоза (главный тест – анализ кала на яйца гельминта).

Toxocara, IgG, титр – количественное определение специфических антител IgG к возбудителю токсокароза (Тохосаra canis). Серологические тесты обладают достаточно высокой чувствительностью (78 %) и специфичностью (92 %) и могут служить хорошим дополнением или даже альтернативой “золотому стандарту” диагностики данного заболевания – микроскопическому исследованию биопсии ткани, содержащей личинки гельминта (частая локализация – печень и легкие), учитывая, что многие пациенты с токсокарозом – маленькие дети.

Учитывая системный характер таких инфекций, как эхинококкоз, описторхоз и токсокароз, при подозрении на эти заболевания проводят дополнительные обследования, в том числе оценку функции печени.

Trichinella, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю трихинеллеза (Trichinella spiralis и родственные виды). Серологические тесты становятся положительными через 3 недели после инфицирования. Учитывая, что личинки гельминта поражают мышечную ткань, при данном заболевании также могут быть повышены следующие клинико-лабораторные маркеры: креатинкиназа (КК), лактатдегидрогеназа (ЛДГ) и аспартатаминотрансфераза (АСТ).

Ascaris lumbricoides, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю аскаридоза. Аскаридоз – это самый распространенный гельминтоз человека. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики аскаридоза (главный тест – выявление взрослых особей в области рта и ануса, а также анализ кала на яйца гельминта).

Giardia lamblia, антитела – определение специфических антител к возбудителю лямблиоза. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики лямблиоза (главный тест – анализ кала на цисты паразита). Серологический тест становится отрицательным через 1 год после перенесенной инфекции. Также может быть использован тест на антиген G. lamblia в кале.

Энтеробиоз – распространенный гельминтоз, вызываемый Enterobius vermicularis (острица). Яйца остриц не выделяются с калом, поэтому микроскопическое или любые другие исследования кала не применяются. Лабораторная диагностика энтеробиоза осуществляется с помощью специального метода – микроскопического исследования мазков-отпечатков с кожи перианальной области. Микроскопическое исследование позволяет произвести дифференциальную диагностику энтеробиоза с аскаридозом, а также другими неинфекционными заболеваниями, сопровождающимися зудом перианальной области (контактным дерматитом, сахарным диабетом). Учитывая повышенную активность самки в ночные часы, оптимально производить мазок-отпечаток с утра, до совершения утреннего туалета.

Комбинация общеклинических и специфических тестов позволяет достичь наибольшей точности при диагностике гельминтозов и паразитозов. При эффективном лечении изменения, выявленные в общеклинических тестах, нормализуются, а яйца/личинки/взрослые особи гельминтов или цисты простейших перестают определяться, но серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики кишечных гельминтозов и протозойных инфекций.

Когда назначается исследование?

  • При обследовании детей и людей из группы риска заражения гельминтами и простейшими (ветеринары, фермеры, работники, занятые в санитарно-гигиентической сфере);
  • при наличии признаков глистной инвазии или протозойной инфекции: хронической диареи, мальабсорбции, тошноты, потери веса, а также признаков реакции гиперчувствительности (крапивницы и других сыпей);
  • при оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации.

Что означают результаты?

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

В норме яйца, личинки и взрослые особи гельминтов, цисты и вегетативные формы простейших в кале отсутствуют. Их обнаружение свидетельствует о текущей инфекции.

Серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Что может влиять на результат?

  • Время, прошедшее с момента заражения: яйца гельминтов и цисты простейших могут быть обнаружены через 2-4 недели и позже после заражения.
  • Характер и скорость образования яиц гельминтов и цист простейших: часто наблюдается прерывистый характер их поступления в кал, что может привести к получению ложноотрицательного результата и обуславливает необходимость исследования трех, а не одного образца кала.



  • Для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту;
  • результат комплексного анализа следует интерпретировать с учетом анамнестических, клинических и инструментальных данных;
  • отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, педиатр, инфекционист.

Назначение ИФА для диагностики заражения на гельминтоз, суть метода

Он позволяет по крови больного обнаружить присутствие антигенов и антител к паразитам разных типов. Точность тестов зависит от: типа паразита, его активности к размножению, концентрации в организме.

Иммунный рефлекс может связывать биологические молекулы, части клетки и микроорганизмы, которые необходимо обнаружить в ходе проведения теста, а ферментативная реакция позволяет визуально оценить и измерить показатели этой реакции. Другими словами, иммунная реакция является частью сложной методики, которая прямым образом может обнаружить искомый микроб в отобранном образце. А ферментативная реакция — частью, позволяющей перевести полученный результат в форму, которую можно оценить глазом и измерить при помощи доступной биохимической методики.

Что такое иммунная реакция, и как выяснить узнаваемость антигена?

Иммунная реакция — процесс связывания антигена с антителом. В результате реакции образуется иммунный комплекс. Антигены — сложные структуры, которые живут на поверхности клетки и несут в себе сведения о клетке. Антигены у людей индивидуальны, они схожи у различных людей, но всегда отличаются и не имеют копий.

Узнаваемость антигена основана на свойстве клетки, распознавать свои и чужеродные клетки ИС. Когда иммунная клетка соединяется с опасной клеткой, образуется чужеродная клетка. На поверхности чужеродной клетки образуется антиген, не совпадающий с тем, который присутствовал в памяти здоровой клетки. Когда клетка обнаруживает чужой антиген, она запускает процесс уничтожения подозрительного объекта. Точность иммунологического распознания составляет в среднем 99,97%.

Антитело, какое это вещество, его виды:

Антитело — динамичная молекула, которая располагается на теле иммунной клетки. Антитело может соединяться с антигенами опасной клетки и передавать сведения в тело клетки для распознавания своей и чужой клетки. При обнаружении своей клетки антитело убивает связь с антигеном и высвобождает клетку.

В природе выявлено пять классов антител, именуемых также белковыми структурами или иммуноглобулинами. Все типы антител имеют способность связываться с различными антигенами в различных частях организма. Антитела именуются знаками латинского алфавита — A, M, G, D и E и в анализах тестов обозначаются следующими буквенными символами: IgA, IgM, IgG, IgD и IgE.

Расшифровка и описание результатов ИФА

При иммуноферментном анализе крови на гельминты, лямблии, глисты и другие паразиты расшифровка результатов устанавливает наличие в организме различных видов антител (иммуноглобулинов) и антигенов — паразитов и продуктов их жизнедеятельности.

Расшифровка при иммуноферментном анализе крови может быть представлена в табличном виде и внутри себя содержать следующие стандартизованные значения классов антител:

JgM (-), JgG (-), JgA (-) — отрицательный результат иммунитета к инфекции;

JgM (-), JgG (+), JgA (-) — присутствие поствакционного (постинфекционного) иммунитета;

JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) — диагностирование острой инфекции;

JgM (+), JgG (+), JgA (+) — диагностирование обострения хронической инфекции;

JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) — присутствие хронической инфекции;

JgM (-) — полное выздоровление.

В иммуноферментном анализе крови в расшифровке знак (+) обозначает положительный результат, а знак (-) — отрицательное значение.

Кроме уточнения классов антител иммуноферментный анализ крови в расшифровке может иметь количественные, цифровые целые или дробные показатели антител. Обширное объяснение значений больному может по требованию предоставить только лечащий врач.

Основным методом лабораторной диагностики гельминтозов в лечебно-профилактических учреждениях является обнаружение яиц, к примеру (аскарид) в фекалиях. Однако результаты такого анализа будут отрицательны в период миграции личинок аскарид, при низкой интенсивности инвазии, а также при наличии одних самцов в кишечнике больного. Кроме того, этот метод пригоден только для диагностики поздней, хронической стадии заболевания. Диагностика ранней миграционной фазы представляет значительную проблему. Эффективность диагностики аскаридоза, особенно на стадии миграции личинок, может быть значительно повышена при использовании в лабораториях иммунологических методов, с помощью которых сыворотку крови обследуемых лиц тестируют на наличие антител к антигенам. Серологические методы диагностики помогают обнаружить антитела к гельминту, которые вырабатываются уже на 5-10 день заражения, однако исчезают из кровотока через 3 месяца.

Результаты серологического анализа крови позволяют диагностировать аскаридоз на ранних стадиях и начать своевременную терапию. Ранний иммунологический анализ позволяет начать лечение до появления осложнений. Диагностическая эффективность ИФА зависит от сроков и интенсивности инвазии, а также состояния иммунной системы инвазированного. Основываясь на особенностях жизненного цикла паразита, активация Т- и В-систем иммунитета наиболее выражена в раннюю миграционную фазу инвазии (10—30 дней), что характеризуется выработкой специфических антител. В более позднюю, кишечную, стадию заболевания интенсивность иммуногенеза снижается, что приводит к уменьшению количества специфических антител в сыворотке инвазированного. Результаты ИФА интерпретирует лечащий врач. Диагностическая чувствительность определения антител класса IgG составляет 94%, диагностическая специфичность — 71%. Следует помнить, что у пациентов с иммунодефицитами и новорожденных серологические данные имеют ограниченное значение. Поэтому результаты исследования следует рассматривать вместе с анамнестическими данными и клинической симптоматикой.

Также следует учитывать, что при лечении гельминтозов в кровь пациента будут выделяться продукты распада гельминтов, и на раннем этапе состояние может ухудшиться, но после полного курса лечения появиться результат. В связи с этим контрольное исследование ИФА назначают после окончания полного курса лечения, спустя 2-3 недели!

Роспотребнадзор (стенд)

Роспотребнадзор (стенд)

Гельминтозы – Полезная информация

Гельминтозы

Гельминтозы

Этиология, классификация, эпидемиология гельминтов

У человека паразитируют черви 2 типов:

  • Nemathelminthes – круглые черви, класс Nematoda;
  • Plathelminthes – плоские черви, которые включают в себя класс Cestoidea – ленточных червей, и Trematoda – класс сосальщиков.

В зависимости от путей распространения паразитов и особенностей их биологии гельминты делятся на 3 группы:

  • биогельминты;
  • геогельминты;
  • контактные гельминты.

Представителями биогельминтов являются свиной, бычий цепни, эхинококк и другие виды червей класса цестод, трематод и отдельных видов нематод. Эти гельминты развиваются с последовательной сменой одного-двух-трех хозяев; промежуточными хозяевами могут быть рыбы, моллюски, ракообразные, насекомые. Иногда промежуточным хозяином является и человек – носитель личиночных форм однокамерного или многокамерного эхинококка или цистицерков – личинок свиного цепня.

Человек заражается биогельминтозом, употребляя в пищу не прошедшее полноценную термическую обработку мясо – инфицированную финнами бычьего цепня говядину, пораженную финнами свиного цепня свинину, малосоленую и сырую рыбу с личинками описторхиса или широкого лентеца. Личинки некоторых гельминтов могут плавать в воде или же прикрепляться к водорослям – в этом случае заражение происходит во время питья зараженной личинками сырой воды, обработки этой водой овощей, фруктов и посуды, употребления в пищу инфицированных водяных растений.

Геогельминты, к которым относятся власоглав, аскарида, анкилостома, некатор и другие виды нематод, развиваются без промежуточных хозяев. Яйца и личиночные формы этих паразитов попадают в почву с фекалиями зараженного человека, а оттуда в организм нового хозяина при несоблюдении им правил личной гигиены (преимущественно с немытыми руками).

К распространенным гельминтозам, передающимся контактным путем, относятся энтеробиоз (возбудитель – острица) и гименолепидоз (возбудитель – карликовый цепень). Заражение этими болезнями происходит при личном контакте здорового человека с зараженным, пользовании общей посудой, предметами туалета, бельем, а также при вдыхании пыли в помещении, в котором находятся зараженные. В случае энтеробиоза очень часто случается самозаражение.

Гельминты определенного вида паразитируют в определенных органах:

  • большинство цестод (свиной, бычий, карликовый цепни) и нематод (анкилостомиды, аскариды, стронгилоиды) – в толстой кишке;
  • острицы и власоглавы – в толстой кишке;
  • трематоды (описторхис, клонорхис, фасциола) – в печени и желчных путях;
  • эхинококковые кисты первично располагаются в печени, а после их разрыва дочерние пузыри можно обнаружить в брыжейке, листках брюшины, селезенке и других органах;
  • личинки (цистицерки) свиного цепня из просвета кишки попадают в кровоток и с ним распространяются по организму, оседая в жировой клетчатке, сосудах мышц, камерах глаза, мозге.

В патогенезе гельминтозов принято выделять 2 основные фазы: острую и хроническую.

Острая фаза длится в течение 2–3, а в отдельных, особо тяжелых, случаях и до 8 недель с момента попадания гельминта в организм – инвазии. Клинические проявления данной фазы не зависят от вида возбудителя и обусловлены общей аллергической реакцией на инородный генный материал мигрирующих по организму личинок.

Острая фаза гельминтоза через максимум 2 месяца после инвазии переходит в хроническую. Нарушения и связанные с ними клинические проявления этой фазы напрямую зависят как от локализации возбудителя, так и от его количества и особенностей питания. Гельминты оказывают механическое воздействие на ткани и органы, в которых они расположены, травмируя и сдавливая их. Кроме того, паразиты поглощают питательные вещества организма хозяина, нарушают нейрогуморальную регуляцию и процессы всасывания в кишечнике, вызывая многие расстройства, среди которых анемия и гиповитаминозы. В хронической фазе также продолжается воздействие паразита на иммунитет хозяина – он снижается, в результате чего снижается и резистентность человека к возбудителям вирусных, бактериальных и грибковых инфекций. Некоторые виды гельминтов повышают риск образования раковой опухоли в поражаемых ими органах.

Стоит сказать несколько слов и о феномене иммунологической толерантности, который нередко имеет место при гельминтозах. Клинически этот синдром проявляется отсутствием признаков острой фазы заболевания, легким или даже субклиническим течением фазы хронической.

Клиническая картина гельминтозов

Первые признаки при клинически выраженных формах различных гельминтозов проявляются в разные сроки после инвазии: при аскаридозе – на 2–3 день, основной массе паразитозов – через 14–21 день, при филяриозе – через 6–18 месяцев.

В острой фазе заболевания больные предъявляют жалобы на:

  • зудящие рецидивирующие высыпания на коже;
  • локальные или генерализованные отеки;
  • лихорадку;
  • увеличение регионарных лимфатических узлов;
  • боли в мышцах и суставах;
  • кашель, приступы удушья, боли в грудной клетке;
  • боли в животе, тошноту, рвоту, расстройства стула.

Серьезными поражениями, характерными для острой фазы заболевания, являются:

  • пневмония;
  • аллергический миокардит;
  • менингоэнцефалит;
  • гепатит;
  • нарушения гемостаза.

При обследовании у зараженных может обнаружиться увеличение печени и селезенки – гепатоспленомегалия, в крови – повышенное количество эозинофилов – эозинофилия, дисбаланс разных видов белка – диспротеинемия.

В хронической фазе гельминтозов клинические проявления напрямую зависят от того, в каких органах паразитирует гельминт, от интенсивности инвазии и даже от его размеров. Существует определенный уровень численности каждого вида паразита, при котором возникают те или иные клинические проявления. Паразитирование в кишечнике единичных особей гельминтов будет протекать бессимптомно, но в случае крупных особей (например, лентеца широкого) симптоматика вероятнее всего проявится.

Кишечные гельминтозы проявляются диспепсическим, болевым и астеноневротическим синдромами, которые в большей мере выражены у детей. Аскаридоз в случае массивной инвазии нередко осложняется кишечной непроходимостью, панкреатитом и механической желтухой. Самым ярким симптомом при энтеробиозе является вечерний и ночной перианальный зуд.

Трематодозы печени (фасциолез, описторхоз, клонорхоз) чаще всего вызывают хронический панкреатит, гепатит, холецистохолангит и разного рода неврологические нарушения.

Анкилостомидозы проявляются прежде всего признаками железодефицитной анемии (слабость, утомляемость, бледность), поскольку анкилостомы питаются кровью и, повреждая сосуды, провоцируют хроническое кровотечение из них.

Филяриозы для нашей местности нехарактерны – регистрируемые случаи этого заболевания являются завозными. Для филяриозов характерен аллергический синдром разной степени выраженности, поражение регионарных лимфоузлов.

Шистосомозы являются также завозным гельминтозом. Хроническая форма мочеполового шистосомоза характеризуется явлением терминальной гематурии (появлением в самом конце мочеиспускания капельки крови), а также частыми позывами на мочеиспускание, болью во время него. При кишечном шистосомозе у больных присутствует симптоматика колита (боли по ходу кишечника, вздутие его, нарушения стула, стул с примесью крови).

Тениаринхоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, тениоз и другие кишечные цестодозы часто протекают бессимптомно или малосимптомно (с явлениями диспепсии и болевым синдромом). Нередко зараженные замечают наличие члеников паразита в каловых массах либо, при тениаринхозе, члеников, свободно передвигающихся по поверхности тела. Признаком дифиллоботриоза является В12-дефицитная анемия.

Такие гельминтозы, как альвеококкоз, цистицеркоз, эхинококкоз, могут протекать бессимптомно в течение длительного времени, но нагноение или разрыв даже небольших кист, содержащих паразитов, может привести к анафилактическому шоку, перитониту, плевриту и другим тяжелейшим последствиям. Поражение центральной нервной системы цистицерком проявляется разнообразной неврологической симптоматикой. Для токсокароза характерны легочный (кашель разной степени интенсивности, одышка, приступы удушья) и абдоминальный (боли в животе, тошнота, рвота, вздутие кишечника. расстройства стула) синдромы, расстройства нервной системы, поражение глаз и повышение числа эозинофилов в крови.

В острой фазе гельминтозов на паразитов реагирует кровеносная система, что проявляется следующими изменениями:

  • повышением количества эозинофилов в общем анализе крови;
  • повышение содержания прямого билирубина, АЛТ и АСТ, щелочной фосфатазы, тимоловой пробы, активности амилазы в биохимическом анализе – характерно для трематодозов.

Диагностика острой фазы гельминтозов, а также заболеваний, вызванных личиночными стадиями (эхинококкоз, альвеококкоз) и тканевыми гельминтами, основывается и на серологических методах: РИФ, РНГА, ИФА и других.

На наличие гельминтов, фрагментов их, личинок и яиц исследуют следующие биологические материалы:

  • фекалии;
  • кровь;
  • мочу;
  • содержимое двенадцатиперстной кишки;
  • желчь;
  • мокроту;
  • мышечную ткань;
  • ректальную и перианальную слизь.

Исследуемый материал исследуют макроскопически (на определение целых гельминтов или их фрагментов) и микроскопически (на наличие яиц и личиночных форм).

Наиболее частым материалом для исследования являются фекалии. Поскольку гельминты выделяются с калом не в любую стадию своего развития, чтобы увеличить вероятность обнаружить их пациентам, дается рекомендация сдавать кал трижды через 3–4 дня.

Энтеробиоз диагностируется путем обнаружения остриц в материале, взятом с перианальных складок при помощи шпателя, тампона или отпечатка с использованием липкой ленты.

Гельминтов, паразитирующих в печени и желчевыводящих путях, а также в поджелудочной железе и двенадцатиперстной кишке, обнаруживают в дуоденальном содержимом и желчи.

Чтобы диагностировать филяриоз, необходимо исследовать кровь и срезы кожи.

Чтобы уточнить расположение гельминтов, используют:

  • УЗИ;
  • эндоскопию с эндобиопсией;
  • компьютерную томографию.

Лечение острой фазы гельминтозов базируется на десенсибилизирующей и дезинтоксикационной терапии:

  • инфузии гемодеза, изотонического раствора глюкозы, физраствора;
  • аскорбиновая кислота;
  • витамин В6;
  • бикарбонат натрия;
  • кальция хлорид или глюконат;
  • при гипертермии – анальгин, димедрол;
  • антигистаминные препараты (Супрастин, Пипольфен);
  • при повышенном давлении – Кордиамин.

Вышеуказанные препараты вводятся в основном инфузионно, реже путем инъекций.

В тяжелых случаях (при развитии гепатита, аллергического миокардита) показано назначение гормональных препаратов, в частности Преднизолона. Параллельно с ним пациент должен получать препараты калия.

В случае развития сердечной недостаточности применяют Коргликон и Кокарбоксилазу, при отеках – Фуросемид илиТорасемид.

Основой борьбы с любым гельминтозом является специфическое лечение. Наиболее часто применяются следующие высокоактивные и в тоже время малотоксичные препараты:

  • Левамизол (чаще – при аскаридозе);
  • Албендазол (трихинеллез, стронгилоидоз, анкилостомидоз, трихоцефалез, аскаридоз и энтеробиоз);
  • Мебендазол (трихинеллез, аскаридоз, энтеробиоз, трихоцефалез и анкилостомидоз);
  • Пирантел (энтеробиоз, аскаридоз);
  • Медамин (стронгилоидоз, аскаридоз, энтеробиоз, трихоцефалез и анкилостомидоз);
  • Празиквантел (описторхоз, клонорхоз, парагонимоз, шистосомоз, дифиллоботриоз, тениидозы);
  • Диэтилкарбамазин (филяриоз).

Кратность приема препарата и его дозировки различны для разных гельминтозов и также зависят от возраста или массы тела больного.

Параллельно с лечебными мероприятиями, указанными выше, проводится симптоматическое лечение, цель которого – устранение симптомов, вызванных патологическим воздействием гельминта на организм зараженного.

Основой первичной профилактики любого вида гельминтозов (т. е. предотвращение заражения) является формирование как у ребенка, так и у взрослого, здорового образа жизни, включающего в себя социальное благополучие семьи, уровень культуры всех ее членов, материальную обеспеченность и т. д. Важный момент в борьбе с гельминтозами – использование в быту только качественной, не зараженной паразитами воды.

Предупредить распространение инфекции от зараженного всем членам семьи можно при использовании индивидуального полотенца, посуды, предметов личной гигиены и других принадлежностей повседневного использования.

В случае наличия в доме домашних животных следует обеспечить за ними правильный уход, включающий в себя их регулярную вакцинацию и дегельминтизацию.

В весенне-летний период не следует забывать о возможности заражения гельминтами путем употребления в пищу грязных овощей, фруктов, ягод, а также через почву и воду. Риск этого значительно падает при соблюдении правил личной гигиены и тщательном мытье плодов перед употреблением.

Важнейшим мероприятием профилактики является достаточная термическая обработка мясных и рыбных продуктов. Не следует употреблять в пищу сырую рыбу (например, суши).

Профилактику гельминтозов можно проводить путем использования медикаментов. Показания:

  • регулярный контакт с домашними животными;
  • нахождение детей в детских коллективах;
  • контакт с землей;
  • увлечение рыбалкой или охотой;
  • частые поездки в экзотические страны.

Медикаментозную профилактику требуется проходить всей семьей 2 раза в год (например, весной и осенью). Наиболее часто с этой целью используется препарат Албендазол, который назначается по схеме: детям старше 2 лет и взрослым 400 мг (1 таблетка или 10 мл суспензии) препарата 1 раз в день после еды в течение 3 дней.

Кровь на гельминты

Анализ крови на гельминты – высокочувствительный метод диагностики паразитов, который позволяет их обнаружить уже после первой недели от момента контакта, до того, как они достигнут половозрелого состояния и начнут активно размножаться. Исследование представляет собой серологический анализ (основанный на иммунных реакциях) и обеспечивает высокую точность результата.

Чтобы сдать анализ крови на гельминты, можно воспользоваться услугами процедурного кабинета и лаборатории Поликлиники Отрадное. Наши специалисты проводят иммунологические исследования на предмет наличия антител к антигенам гельминтов в течение 2-3 дней. Готовые результаты высылаются на электронный адрес пациента и его лечащего врача.

Показания к назначению анализов на гельминты

Гельминты негативно влияют на общее состояние здоровья человека. Они отравляют организм продуктами своей жизнедеятельности, “воруют” питательные вещества, нарушают иммунные реакции, процессы кроветворения и пищеварения. Некоторые виды паразитов способны проникнуть в головной мозг и привести к патологиям функционирования ЦНС, например, вызвать сбои координации и речевой функции. В тяжелых случаях глистные инвазии становятся причиной летального исхода.

Среди общих признаков паразитарной активности можно выделить следующие:

  • бессонница, беспокойство, раздражительность;
  • неожиданное похудение без видимой причины;
  • мышечная слабость;
  • ухудшение зрения, головные боли;
  • ломкость ногтей, тусклые волосы;
  • кожные высыпания;
  • увеличение печени, болезненность в правом боку;
  • хроническая усталость и слабость;
  • частые простуды и периодическое повышение температуры тела;
  • тошнота, рвота;
  • нарушения стула;
  • вздутие живота, дисбактериоз;
  • нарушения аппетита;
  • повышенное слюноотделение;
  • зуд в области анального прохода.

Самый назначаемый тип анализов для подтверждения гельминтозов – анализ кала на гельминты и соскоб на энтеробиоз. К сожалению эти виды диагностики подтверждают наличие паразитов далеко не во всех случаях. Время проведения теста может не совпасть с циклом размножения гельминта, и яйца в биоматериале будут отсутствовать. Кроме того, на ранних стадиях заражения, когда паразит еще не достиг половозрелой стадии и не начал размножаться, эти методы диагностики вовсе бесполезны.

В такой ситуации наиболее надежный индикатор глистной инвазии – анализ крови.

Обязательному тестированию подлежат люди следующих групп риска:

  • работники медицинских учреждений;
  • владельцы животных (собак, кошек, домашнего скота);
  • обслуживающий персонал детских садов, школ, иных воспитательно-образовательных учреждений;
  • представители сферы общественного питания и работники пищепрома.

Подготовка к сдаче анализа

Перед сдачей крови на анализ придерживайтесь общих требований подготовки:

  1. Кровь сдают натощак, поэтому последний прием пищи должен быть не позднее, чем за 8-10 часов до взятия биоматериала.
  2. Исключите на 3-5 дней все лекарственные препараты (особенно антибиотики). Если это невозможно – оповестите о действующих компонентах и их дозировке своего лечащего врача.
  3. За сутки до процедуры скорректируйте свою диету, исключив нездоровую пищу: алкоголь, сладости, газированные напитки, жареные, маринованные и копченые блюда.
  4. На пару дней снизьте уровень физических нагрузок и постарайтесь избегать стрессовых ситуаций.
  5. Перед исследованием старайтесь не курить..

Как проводится анализ

Анализ крови на гельминты берут из вены, используя стерильный набор инструментов, и исследуют методом иммуноферментного анализа (ИФА). Это «золотой стандарт» современной медицины. Используя ИФА, можно одновременно выявить не только факт наличия гельминтоза у человека, но и определить точную видовую принадлежность возбудителя, его количество в организме и примерную стадию заражения. В основе метода лежит обнаружение специфических антител паразитов.

СПРАВКА! Среди гельминтов имеются представители нескольких различных классов: плоские черви (печеночный и легочный сосальщики), ленточные черви (цепни, эхинококк, широкий лентец) и самый обширный – круглые черви (аскариды, острицы, токсокары, онхоцерки, власоглавы). По этой причине анализ на гельминтозы проводят с определением целого пакета антител, иногда включая и некоторые виды протозойных инфекций (например, лямблий).

Помимо ИФА, существуют и другие методы анализа крови, способные выявить наличие гельминтозов у человека:

  • общий анализ крови: повышенный уровень эозинофилов может косвенно свидетельствовать о наличии глистной инвазии;
  • метод толстой капли: выявляет личинок гельминтов (микрофиллярий) в капле крови, взятой у пациента в ночное время.

Однако оба метода не обладают достаточной точностью и требуют большого количества дополнительных исследований.

Анализ крови на гельминты: расшифровка

Результат может быть отрицательным (гельминт не выявлен) или положительным (вид гельминта присутствует). В последнем случае в графе напротив указывают точный титр антитела, комплементарного антигену того или иного паразита (например, токсокары, аскариды).

СПРАВКА! Гельминты, находясь в организме человека, являются источником чуждых для него антигенов. Это провоцирует ответ иммунной реакции с выработкой антител (иммуноглобулинов). Их концентрация (титр) – надежный качественно-количественный определитель типа возбудителя. По этому титру специалист сможет определить степень заражения организма.

  • 1:100 – результат отрицательный или паразиты присутствуют в организме в очень незначительном количестве;
  • 1:400 – результат сомнительный (характерен для стадии ремиссии);
  • 1:600 – результат положительный, яркая прогрессирующая форма гельминтоза.

Еще один оценочный показатель – коэффициент позитивности:

  • до 0,9 – отрицательный;
  • 0,9-1,1 – сомнительный;
  • более 1,1 – положительный.

О степени заболевания говорят разные типы иммуноглобулинов. Повышение lgМ наблюдается уже через 5 суток от момента заражения, в то время как наличие более “медлительного” lgG говорит о сроке не менее 3 недель. Таким образом, ИФА позволяет с высокой точностью установить диагноз даже в том случае, если в организме присутствуют лишь неполовозрелые или только мужские особи.

ВНИМАНИЕ! При длительных хронических гельминтозах (более 10-ти лет) могут развиваться иммунодефицитные состояния, когда уровень специфических антител к паразитам может снижаться и даже опускаться ниже предельных значений. В такой ситуации для диагностики гельминтоза приходится использовать комплекс других методов, так как данные ИФА теряют свою актуальность.

Окончательной расшифровкой данных с определением интенсивности заражения и назначением подходящего способа лечения занимается врач-гельминтолог. При этом он будет учитывать не только факт самой глистной инвазии, а также общее состояние организма и сопутствующие заболевания.

В некоторых случаях результаты анализа на гельминты могут иметь спорное значение. Повторную проверку для уточнения результата следует проводить не раньше, чем через 2 недели. Для всесторонней оценки ситуации анализ крови дополняют исследованием кала на яйца глистов (для повышения достоверности тест делают несколько раз подряд).

Диагностика гельминтозов в ПолиКлинике Отрадное

Наша клиника оснащена всем необходимым для комплексной диагностики глистных инвазий – к вашим услугам современное диагностическое оборудование, опытные лаборанты, УЗИ-диагностика, консультации профильных специалистов. Удобное расположение клиники позволит быстро доставить биоматериал из любого района СВАО Москвы.

Что такое ИФА?

Иммуноферментный анализ в клинике

Иммуноферментный анализ (ИФА) – лабораторное исследование основанное на высокой избирательности и специфичности иммунологических реакций “антиген-антитело”. Суть метода – выявление специфических антител с помощью специальных биохимических реакций, которые помогают определить присутствие или отсутствие антител и их количество.
Есть десятки модификаций ИФА. Его применяют для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов ( IgA IgM IgG) к антигенам различных возбудителей болезней. Методом ИФА можно определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ, определить антитела к любой половой инфекции. Материалом для исследования может служить кровь, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и т.д.

В основе иммуноферментного анализа лежит иммунная реакция антигена с антителом, а присоединение к антителам ферментной метки позволяет учитывать результат реакции антиген-антитело по появлению ферментативной активности или по изменению ее уровня.

Какие инфекции можно выявить методом ИФА

В основном ИФА применяется для диагностики сифилиса (в комплексе с другими реакциями), ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов. Имеет ограниченное значение для диагностики хламидийной инфекции, цитомегаловирусной инфекции и других герпетических инфекций. Метод ИФА используется также для определения антител при различных инфекционных заболеваниях, уровня гормонов, аутоантител и различных маркеров онкологических заболеваний.

Определение наличия и уровня антител в крови не рекомендуется применять для первичной диагностики инфекций, передающихся половым путем. Единственное исключение – по результатам ИФА возможно распознавание сифилиса в комплексе с реакцией микропреципитации. Но наличие антител в сыворотке крови может свидетельствовать только о контакте организма с возбудителем в данное время или ранее.

Исследование наличия и уровня антител различных классов в некоторых случаях помогает определить стадию инфекционного процесса.

К сожалению, такое важное преимущество ИФА, как количественное определение антител не имеет большого значения в практической работе – т.е. не позволяет точно установить диагноз и не влияет на дозировку и сроки назначения лекарственных средств.

Преимущества ИФА относительно других методов обнаружения антигенов и антител:

– легкость в отслеживании динамики развития процесса инфекционного заболевания.

Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразитозы). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей и контролировать вакцинацию.

Для постановки диагноза по методу ИФА используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику. Надо учитывать, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР или другими методами.

ДИАГНОСТИКА АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Антинуклеарные антитела– это аутоантитела к антигенам ядра клеток. Они образуют иммунные комплексы и откладываются на базальных мембранах различных тканей и органов, тем самым вызывая воспаление и повреждение тканей и сосудов. Образование таких антител характерно для системных аутоиммунных заболеваний. Исследование на антинуклеарные антитела проводится если врача подозревает системное аутоиммунное заболевание.

Антитела к двухспиральной ДНК образуются при системных аутоиммунных поражениях соединительной ткани. Эти иммунные комплексы откладываются на тканях, стенках сосудов и вызывают их повреждение. Антитела к двухспиральной ДНК специфичны для системной красной волчанки.

Антитела к растворимым нуклеарным антигенам (ENA скрин) – скрининговый тест на антитела к растворимым ядерным антигенам – (SSA(Ro), SSB(La), Sm, RNP, Jo1, Scl70). Образуются при многих системных аутоиммунных заболеваниях (системная красная волчанка, синдром Шегрена, склеродермия, полимиозиты, смешанное заболевание соединительной ткани, ревматоидный артрит). Положительные значения анализа являются аргументом наличия у больного аутоиммунного процесса и является показанием для дифференцированного определения титров антител к различным ENA для более точной постановки диагноза. Для дифференцированного определения антител к растворимым ядерным антигенам применяется иммуноферментный анализ -комбинированный ENA.

Антикардиолипиновые антитела IgG, IgM – это аутоантитела к отрицательно заряженным или нейтральным фосфолипидам, фосфолипидсвязывающими сывороточными белками. Антитела к фосфолипидам нарушают нормальное функционирование эндотелия кровеносных сосудов, вызывая сужение сосудов и образование сосудистых тромбов. Обследование назначают при подозрении на антифосфолипидный синдром (рецидивирующие венозные и/или артериальные тромбозы).

Качественное и полуколичественное иммуноферментное определение специфических антител класса IgG к цитрулиновому пептиду. Тест система предназначена для диагностики ревматоидного артрита различных стадий, в т.ч. начало заболевания, когда клинические проявления слабо выражены. Эффективность теста для пациентов с клинически подтвержденным ревматоидным артритом составляет от 78 до 88%.

Ревматоидный фактор обнаруживают при ревматоидном артрите, особенно при наиболее частой и распространенной форме хронического воспаления суставов, именуемой синовиит. 75-80% больных ревматоидным артритом имеют ревматоидный фактор, однако, он не специфичен для ревматоидного артрита так как обнаруживается у здоровых лиц и при ряде других заболеваний.

С реактивный белок – маркер воспалительного процесса. Использование высоко чувствительных импортных тест-систем позволяет выявлять С реактивный белок не только при высоко активном воспалительном процессе, но при хроническом и вялотекущем.

ANCA скрин– определение аутоантител к цитоплазматическим антигенам нейтрофилов (протеиназа 3, миелопероксидаза ). Анализ назначают при подозрении на системные васкулиты, гломерулонефрит.

Все перечисленные исследования доступны в лаборатории клинической иммуногенетики института

Все вышеназванные анализы и методы диагностики доступны всем, без исключения, пациентам, обратившимся в отделение лабораторной диагностики клиники.

Институт клинической и экспериментальной лимфологии – филиал ИЦиГ СО РАН

Диагностика инфекционных заболеваний

Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.

Сеть независимых лабораторий «Ситилаб» в своей работе для диагностики инфекционных заболеваний использует 3 группы специальных лабораторных методов исследования:

  • бактериологические;
  • серологические;
  • метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения ДНК или РНК возбудителя инфекционного заболевания в исследуемом материале.

У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.

Бактериологические методы исследования

Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.

Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне. Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека. Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.

Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.

Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.

Для идентификации вида возбудителя гнойно-воспалительных заболеваний и определения чувствительности к антибактериальным препаратам бактериологические лаборатории используют комплекс методов. Они включают:

  • микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия) из доставленного биоматериала;
  • выращивание культуры микроорганизмов (культивирование);
  • идентификацию бактерий;
  • определение чувствительности к антимикробным препаратам и оценку результатов исследования.

Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.

Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза). Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видов микроорганизмов в биологическом материале, а также дают предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.

Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов. Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды. Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму

1 – стрептококки; 2 – стафилококки; 3 – диплобактерии Фридленда; 4 – пневмококки

Чашки Петри с посевами инкубируют в термостате при определенных температурных, а для ряда микроорганизмов газовых (например, для выращивания анаэробов создают условия с низким содержанием кислорода) режимах в течение 18-24 часов. Затем чашки Петри просматривают. Количественную обсемененность доставленного биоматериала микрофлорой определяют по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл или 1 мг исследуемого образца. При просмотре чашек Петри выявляют некоторые особенности изменения цвета среды, ее просветления в процессе роста культуры. Многие группы бактерий образуют характерные формы колоний, выделяют пигменты, которые окрашивают колонии или среду вокруг них. Из каждой колонии делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Оценивают однородность бактерий, форму и размер, наличие спор или других включений, капсулы, расположение бактерий, отношение к окраске по Граму. Вся эта информация служит важнейшей составляющей для выбора сред и получения в дальнейшем чистой культуры каждого микроорганизма.

Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.

Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.

Идентификация – это комплекс бактериологических методов изучения бактерий, позволяющий определить вид микроорганизма. В Лаборатории «Ситилаб» идентификация большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства: на бланке результата исследования в виде наименования микроорганизма или его рода, например, Streptococcus pneumoniae (пневмококк) или Eschrichia coli (кишечная палочка).

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов, имеющих этиологическое значение для данного заболевания. Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.

В Лаборатории «Ситилаб» определение чувствительности выделенной чистой культуры большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства к широкому спектру современных антибактериальных препаратов (от 6 до 32 препаратов, в зависимости от выделенного микроорганизма) с определением минимальной ингибирующей концентрации (МИК). На бланке результатов определения чувствительности к антибактериальным препаратам обозначение R указывает на резистентность, I – умеренную чувствительность, S – чувствительность микроорганизма к данному препарату.

Оценка результатов исследования. Принадлежность условно-патогенных микроорганизмов к естественной микрофлоре организма человека создает ряд трудностей при оценке их этиологической роли в развитии гнойно-воспалительных заболеваний. Условно-патогенные микроорганизмы могут представлять нормальную микрофлору исследуемых жидкостей и тканей или контаминировать их из окружающей среды. Поэтому для правильной оценки результатов бактериологических исследований необходимо знать состав естественной микрофлоры изучаемого образца. В тех случаях, когда исследуемый биоматериал в норме стерилен, как, например, спинномозговая жидкость, экссудаты, все выделенные из него микроорганизмы могут считаться возбудителями заболевания. В тех случаях, когда исследуемый материал имеет собственную микрофлору, как, например, отделяемое влагалища, кал, мокрота, нужно учитывать изменения ее качественного и количественного состава, появление несвойственных ему видов бактерий, количественную обсемененность биоматериала. Так, например, при бактериологическом исследовании мочи степень бактериурии (число бактерий в 1 мл мочи), равная и выше 10 5 , свидетельствует об инфекции мочевых путей. Более низкая степень бактериурии встречается у здоровых людей и является следствием загрязнения мочи естественной микрофлорой мочевых путей.

Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.

Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.

Серологические методы исследования

В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.

1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой в начале заболевания (3-7-й день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.

С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (IgM и IgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики. При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентом в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М. Лишь позднее, на 8-12 день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G. При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А (IgA), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.

2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.

Серологические исследования не обладают 100%-й чувствительностью и специфичностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей. В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания. Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.

В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.

Авидность – характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами. В ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента стимулированный клон лимфоцитов начинает вырабатывать сначала специфические IgM-антитела, а несколько позже и специфические IgG-антитела. IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген.

Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях.

Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента. В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.

Метод полимеразной цепной реакции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать.

Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы.

Введение в реакцию дополнительного этапа – синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы – позволило тестировать РНК-вирусы, например, вирус гепатита С. ПЦР – это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК идентифицируют методом иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал – сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких как вирусные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфекции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д.

Преимущества ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими методами исследований заключаются в следующем:

  • возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организма, в том числе и материале, получаемом при биопсии;
  • возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболевания;
  • возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);
  • высокая чувствительность метода; например, чувствительность ПЦР для выявления ДНК вируса гепатита В в крови составляет 0,001 пг/мл (приблизительно 4,0 . 10 2 копий/мл), в то время как метода гибридизации ДНК с использованием разветвленных зондов – 2,1 пг/мл (приблизительно 7,0 . 10 5 копий/мл).

Федеральное Бюджетное Учреждение Науки «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Федеральной Службы по Надзору в Сфере Защиты Прав Потребителей и Благополучия Человека

О нашем институте

Лабораторная диагностика паразитозов

Каких паразитов можно обнаружить в фекалиях?


Фауну пищеварительного тракта делят на две большие группы-простейшие кишечника и гельминты. На сегодняшний день известно более 250 возбудителей гельминтозов у человека; из них наиболее распространены около 50 видов. Паразитирующие в организме человека гельминты, в основном, представлены круглыми (класс Nematoda); плоскими червями (класс сосальщиков Trematoda и ленточных червей Cestoidea).

К представителям круглых червей относятся острицы, аскариды, трихинеллы; власоглав; ленточных– бычий, свиной и карликовый цепни, эхинококки, широкий лентец; сосальщиков – кошачья и печеночная двуустки.

В фекалиях могут быть обнаружены вегетативные стадии и цисты более 20 видов простейших, яйца и личинки многих видов гельминтов

Прямые методы позволяют непосредственно выявить гельминты, их фрагменты, личинки или яйца. При исследовании прямыми методами чаще всего используются фекалии.

Иммунологические (косвенные) методы диагностики основаны на обнаружении в сыворотке крови спецефических антител к антигенам тех или иных гельминтов и простейших. Для некоторых паразитов (лямблии, аскариды, анизакиды, описторхи) иммунологические методы применяются для оценки адекватности иммунного ответа на антигены, также, они могут быть и самостоятельными диагностическими тестами.

Для ряда гельминтов (токсокара, эхиннокок), яйца которых не обнаруживаются прямыми методами копрологической диагностики, иммунологические методы являются основными диагностическими тестами.

На результаты исследования влияет срок поступления и хранения материала. При подозрении на инфицирование некоторыми паразитами кал должен быть исследован немедленно, или в течении 30-40 минут после дефекации. Более оптимальным является исследование кала с применением специальных консервантов.

Современные методы паразитологической диагностики включают методы флотации, седиментации, комбинированные, с использованием концентраторов и консервантов для оптимального сохранения материала.

-Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов комплексным методом

-Исследование кала на простейшие без использования консерванта

-Исследование кала на простейшие (с использования консерванта)

-Исследование кала на яйца гельминтов методом Като

-Микроскопическое исследование отпечатков с поверхности кожи перианальных складок на яйца остриц

-Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов комбинированным гельминтоовоскопическим методом

-Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов комплексным методом с использованием концентратора Parasep

Правила подготовки к исследованию кала


– Кал собирают на протяжении 3 дней ежедневно (при дефекации каждый день) или через день (при запоре и опорожнении кишечника не ежедневно)

-Кал забирают ложечкой из контейнера (на кончике ложечки) из нескольких мест, общий ежедневный объем кала должен быть приблизительно с горошину, помещают в контейнер, перемешивают круговыми движениями, до исследования кал сохраняют в темном прохладном месте (не в холодильнике!) –оптимально на полу в туалетной комнате

-перед исследованием (за 1-2 дня) не рекомендуется употреблять в пищу грибы, печень, большое количество грубой клетчатки

-после приема масляных клизм должны пройти несколько суток

-в случае лечения антибиотиками широкого спектра действия кал для исследования рекомендуется собирается через 7-10 дней после окончания приема препаратов

-жидкий стул следует собрать однократно, в количестве не менее 2-4 мл (приблизительно объем с чайную ложку)

-Исследование кала на простейшие необходимо проводить 3-х кратно с интервалом в 5-8 дней (если врач не назначил Вам обследование по другой схеме)

Выявление антител к паразитам и оценка адекватности специфического иммунного ответа

В организме человека определяется наличие различных видов антител (иммуноглобулинов) к антигенам паразитов. Для выявления антител чаще всего используется метод иммуноферментного анализа (ИФА)-лабораторное исследование, основанное на реакции «антиген-антитело».

Через неделю с момента заражения в сыворотке крови больного выявляются специфические антитела класса IgM, позже выявляются антитела класса Ig G. После выздоровления пациента антитела к антигенам паразитов класса IgG довольно длительное время могут сохраняться. Содержание этих антител постепенно снижается в течение 2 -12 месяцев после гибели паразитов.

Преимущества диагностики паразитозов с помощью метода ИФА:

Возможность ранней диагностики инвазии

Короткий срок получения результатов

Относительно невысокая стоимость

Выявление антител к паразитам и оценка адекватности специфического иммунного ответа


Антител к антигенам лямблий- Ig M, суммарные

Антител к антигенам паразитов:

Как подготовиться к исследованию крови на выявление антител к паразитам

Кровь для анализа сдается из вены натощак.

За 10 часов до исследования необходимо исключить употребление алкоголя

Лекарства искажают результаты исследований. Пациент должен сообщить специалисту о постоянном приеме каких-либо медикаментов.

Результаты исследования выдают в регистратуре поликлиники

Ссылка на основную публикацию