Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева, нормы показателей и отклонения

Гематологические исследования

1. Общий анализ крови

WBC -Общее количество лейкоцитов (х10 9 /л)

RBC -Общее количество эритроцитов (10 12 /л)

HGB -Гемоглобин (г/л)

HCT -Гематокрит (%, л/л)

MCV -Средний объем эритроцита (фл)

MCH -Среднее содержание гемоглобина в эритроците (пг)

MCHC -Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (%)

RDW-SD -Ширина распределения эритроцитов по объему (%)

RDW-CV -Ширина распределения эритроцитов по объему (фл)

PLT -Общее количество тромбоцитов (х109/л)

PDW -Ширина распределения тромбоцитов по объему (%)

MPV -Средний объем тромбоцитов (фл)

P-LCR -Количество гигантских ( ˃12 мкм) тромбоцитов (%)

IG % -Относительное количество незрелых гранулоцитов (%)

NEUT % -Относительное количество нейтрофилов (%)

LYMPH % -Относительное количество лимфоцитов (%)

MONO % -Относительное количество моноцитов (%)

E0% -Относительное количество эозинофилов (%)

BASO % -Относительное количество базофилов (%)

IG # -Абсолютное количество незрелых гранулоцитов (х10 9 /л)

NEUT# -Абсолютное количество нейтрофилов (х10 9 /л)

LYMPH # -Абсолютное количество лимфоцитов (х10 9 /л)

MONO# -Абсолютное количество моноцитов (х10 9 /л)

E0# -Абсолютное количество эозинофилов (х10 9 /л)

BASO# -Абсолютное количество базофилов (х10 9 /л)

Анализ выполняется на гематологических анализаторах фирмы SYSMEX.

2. Посчет тромбоцитов (на анализаторе и при микроскопии по Фонио)

Тромбоциты – безъядерные клетки крови дисковидной формы размером 2 – 4 микрометра. Тромбоциты выполняют ангиотрофическую и адгезивно-агрегационную функции и принимают участие в процессах свертывания и фибринолиза, обеспечивают ретракцию (уплотнение) кровяного сгустка. Они способны переносить на своей мембране циркулирующие иммунные комплексы, поддерживать спазм сосудов. При активации тромбоциты приобретают сферическую форму и образуют специальные выросты (псевдоподии), с помощью которых они соединяются между собой (агрегируют) и прилипают к поврежденной стенке сосуда (способность к адгезии). Активированные тромбоциты выбрасывают содержимое своих гранул в кровяное русло: факторы свертывания, пероксидазу, серотонин, ионы кальция, АДФ, фактор Виллебранда, тромбоцитарный фибриноген, фактор роста тромбоцитов, которые участвуют в процессе свертывания.

Анализ включает в себя определение следующих параметров:

PLT -Общее количество тромбоцитов (х10 9 /л)

PDW – Ширина распределения тромбоцитов по объему (%)

MPV – Средний объем тромбоцитов (фл)

P-LCR -Количество гигантских ( ˃12 мкм) тромбоцитов (%)

Тромбоциты по Фонио (х10 9 /л)

Анализ выполняется на гематологических анализаторах фирмы SYSMEX и с помощью микроскопа фирмы OLIMPUS.

Подсчет количества тромбоцитов осуществляется двумя методами:

– на гематологическом анализаторе окрашенных специальным красителем тромбоцитов (оптический метод)

– при световой микроскопии окрашенного мазка крови с использованием иммерсионного масла

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

ПОКАЗАНИЯ К НАЗНАЧЕНИЮ

  • Тромбоцитопении
  • Тромбоцитоз

ПРИЧИНЫ ТРОМБОЦИТОЗА (увеличение количества тромбоцитов)

Реактивный тромбоцитоз (носит временный характери вызван активацией кроветворения)

  • После спленэктомии ( 3 -6 месяцев)
  • После острой кровопотери (кровоизлияния, оперативные вмешательства)
  • После острого гемолиза
  • При злокачественных новобразованиях
  • Ревматоидный артрит
  • Язвенный колит
  • Остеомиелит
  • Туберкулез

Опухолевый тромбоцитоз (при миелопролиферативных заболеваниях)

  • Миелоидный лейкоз
  • Эритремия
  • Идиопатическая геморрагическая тромбоцитоемия

ПРИЧИНЫ ТРОМБОЦИТОПЕНИИ (уменьшение количества тромбоцитов)

  • Идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура
  • Гипо- и апластические анемии
  • Ауто- и имунные гемолитические анемии
  • Лейкозы
  • Метастазы рака в костный мозг
  • Дефицит витамина В12 и фолиевой кислоты
  • Лекарства
  • Вирусные инфекции (в т.ч. системная красная волчанка)
  • Лимфопролиферативные заболевания
  • Протезирование клапанов сердца
  • Экстракорпральное кровообращение
  • Портальная гипертензия

3. Подсчет ретикулоцитов

Количество ретикулоцитов в периферической крови является показателем активности эритропоэза, то есть отражает эритропоэтическую активность костного мозга.

Анализ включает в себя определение 7 параметров:

RET% – Относительное количество ретикулоцитов (%0)

RET# -Абсолютное количество ретикулоцитов (х10 9 /л)

IRF% – Относительное количество незрелых ретикулоцитов (%)

LFR% – Относительное количество зрелых ретикулоцитов (%)

MFR% – Относительное количество средних ретикулоцитов (%)

HFR% -Относительное количество больших ретикулоцитов (%)

RET – He -Содержание гемоглобина в ретикулоците (пг)

Анализ выполняется на гематологических анализаторах фирмы SYSMEX.

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

ПОКАЗАНИЯ К НАЗНАЧЕНИЮ

  • Анемии (критерий диагностики апластической анемии)
  • Диагностика эффективности эритропоэза
  • Оценка терапии неэффективного эритропоэза препаратами витамина В12, ЭПО, препаратами железа
  • Лейкозы
  • Миелодиспластические синдромы
  • Оценка состояния после трансплантации костного мозга

ПРИЧИНЫ РЕТИКУЛОЦИТОЗА (повышение количества ретикулоцитов)

  • Острая геморрагическая анемия (после острой кровопотери на 3-4 сутки)
  • Гемолитическая анемия
  • Эффективная терапия следующими препаратами:

витамин В12 (ретикулоцитарный криз на 5 – 8 день терапии)

  • препараты железа

препараты для лечения эритремии

препараты для лечения паркинсонизма

  • Гемолиз
  • Гемолитическая анемия
  • Талассемия
  • Малярия
  • Эритролейкозы
  • Метастазы в костный мозг
  • Успешная трансплантация костного мозга ( увеличение более чем на 20%)
  • Употребление допинга спортсменами (прием ЭПО)
  • Курение

ПРИЧИНЫ РЕТИКУЛОЦИТОПЕНИИ (снижение количества ретикулоциов)

  • Апластическая анемия
  • Анемии хронических заболеваний
  • Железодефицитная анемия
  • Сидеробластная анемия
  • В12-дефицитная анемия
  • Миелодиспластические синдромы
  • Опухолевые процессы в костном мозге
  • Нарушения работы щитовидной железы (микседема)
  • Тяжелые болезни почек (снижение эритропоэза)
  • Тяжелый алкоголизм
  • Хронические инфекции
  • Прием оральных контацептивов, противосудорожных препапратов

4. Определение СОЭ

Анализ включает в себя определение следующего параметра:

СОЭ -Скорость оседания эритроцитов (мм/ч).

Анализ выполняется по методу Панченкова как на анализаторе ROLLER,так и с помощью ручной методики.

5. Подсчет формулы крови (микроскопия)

Анализ включает в себя следующие параметры:

ПЯ % – Относительное количество палочкоядерных нейтрофилов (%)

СЯ % – Относительное количество сегментоядерных нейтрофилов (%)

ЛФ % -Относительное количество лимфоцитов (%)

МОН % -Относительное количество моноцитов (%)

ЭОЗ% -Относительное количество эозинофильных нейтрофилов (%)

БАЗ % -Относительное количество базофильных нейтрофилов (%)

Анализ выполняется путем подсчета групп лейкоцитов в окрашенном с помощью автоматической системы для окраски HEMATEK мазке крови при помощи световой микроскопии.

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

6. Определение свободного гемоглобина в плазме

У здоровых лиц в плазме содержится лишь незначительное (1—4 мг%) количество свободного гемоглобина. Это гемоглобин, выделившийся из закончивших свой жизненный цикл эритроцитов. Содержание свободного гемоглобина в плазме меняется в зависимости от интенсивности гемолиза и гемоглобинсвязывающей способности белков плазмы.

Анализ включает в себя определение следующего параметра:

Hb св. – Свободный гемоглобин (г/л)

Анализ выполняется на анализаторе HemoCue.

* Для расчета процента гемолиза, помимо определения свободного гемоглобина, нужен клинический анализ крови.

ПРИЧИНЫ ГЕМОГЛОБИНЕМИИ (повышенное содержание свободного гемоглобина в плазме крови)

Как правило, причиной повышения концентрации свободного гемоглобина являются состояния, при которых происходит повышенное разрушение эритроцитов:

  • Гемолитические анемии
  • Гемолитическая болезнь новорожденных
  • Гемоглобинопатии (серповидноклеточная анемия и ее варианты, талассемия, гемоглобиноз С),
  • Отравление гемолитическими ядами (чаще всего при укусах змей) с последующим развитием ДВС-синдрома
  • Гемолитические кризы в результате тяжелых посттрансфузионных реакций, при групповой или резус-несовместимости
  • Инфекционные заболевания (при малярии и как вторичный симптом при сепсисе)
  • Массивные ожоги (термические или химические)
  • Физиологическая гемоглобинемия (в результате воздействия на эритроидные клетки, расположенные в ткани легких или желудка при курении, гастрите, язвенной болезни).

7. Подсчет шизоцитов

Анализ включает в себя определение следующего параметра:

Шизоциты – (шт. на 10000 эритроцитов)

Подсчет шизоцитов (фрагментов эритроцитов) осуществляется при помощи световой микроскопии окрашенного мазка крови с использованием иммерсионного масла.

* Анализ выполняется совместно с клиническим анализом крови.

Лейкоциты в крови: норма по возрасту, причины повышенных и пониженных значений

Лейкоциты – важнейший элемент крови и основа иммунитета организма. Наша кровь красного цвета, благодаря эритроцитам – красным кровяным тельцам. На каждую тысячу эритроцитов приходится в среднем всего один лейкоцит. Однако, несмотря на небольшое процентное соотношение, эти клетки играют важную роль в здоровье человека. Они различны по функциям, форме, внешнему виду. Их главная задача – защищать организм от нападающих на него вирусов, бактерий, грибков и прочих «вредителей», бороться с повреждениями ткани и уничтожать собственные состарившиеся или мутировавшие клетки. Они фундамент защитных сил организма.

Несмотря на то, что лейкоциты определяются в основном в крови, вырабатывает их особый орган – костный мозг. Соответственно, они образуются в ответ на любое повреждение тканей. Это элемент здоровой, естественной воспалительной реакции.

Виды лейкоцитов

Под микроскопом можно разглядеть несколько десятков разных форм лейкоцитов – разной стадии созревания, или «возраста». Выделяют 5 основных групп зрелых клеток.

Базофилы – наименьшая по численности группа лейкоцитов. Они регулируют кровоток в небольших сосудах, помогают другим белым кровяным тельцам передвигаться в тканях, воздействуют на рост новых капилляров. Базофилы контролируют возникновение аллергических реакций, подавляют аллергены, регулируют свертываемость крови, нейтрализуют токсины и яды. Когда аллерген контактирует с базофилом, эта клетка выбрасывает множество биоактивных веществ, ответственных за развитие аллергических реакций.

Эозинофилы – вместе с базофилами они являются маркерами гуперчувствительной реакции в организме. Они тоже участвуют в аллергических механизмах, но другим образом. В отличие от базофилов, которые вызывают аллергическую реакцию, эозинофилы, наоборот, борются с ней, связывая чужеродные частицы. Обладают противопаразитарной и бактерицидной активностью, отвечают за борьбу с многоклеточными паразитами – гельминтами. Их процент в крови в норме – около 1-4%. Повышение содержания, прежде всего, может свидетельствовать о выраженных аллергических состояниях, гельминтозах, ревматологических заболеваниях, реже – онкологической патологии.

Нейтрофилы – отряд быстрого реагирования и наиболее многочисленная группа лейкоцитов (до 80% от общего числа). Как только чужеродное вещество (например – заноза, бактерия, или вирус) попадает в организм, нейтрофилы тут же к нему перемещаются, чтобы уничтожить. Они выбрасывают в сторону инородного интервента множество активных ферментов и буквально расщепляют и переваривают любое, не относящееся к организму, вещество – этот процесс называется фагоцитозом. Увы, победив в нескольких таких боях, нейтрофилы и сами погибают.

Моноциты – вид крупных клеток. Они также осуществляют фагоцитоз – «съедают» бактерии и микробы, проникающие в организм, очищают кровь от погибших лейкоцитов и вырабатывают интерферон. Умеют передавать информацию лимфоцитам о том, с каким микробом столкнулись.

Лимфоциты – главные в осуществлении клеточного и гуморального иммунитета. Они выделяют защитные антитела и координируют работу всех остальных видов белых телец.

Как мы видим, лейкоциты – настоящая армия иммунной системы, стоящая на страже нашего здоровья. Без их корректной работы человек беззащитен перед вирусами, бактериями и грибками.

Анализ на лейкоциты в крови

Для определения уровня лейкоцитов используется классический общий анализ крови – самое востребованное исследование, без которого не обходится ни одно обследование.

Помимо определения пяти видов белых телец, анализ выявляет количество и характеристики эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов и других компонентов крови.

Также он необходим при диагностике анемий, диагностике и лечении воспалительных процессов, в качестве элемента профилактического обследования, при диагностике разнообразного спектра заболеваний и для мониторинга за лечением.

Норма лейкоцитов в крови

Говоря о норме практически любого лабораторного анализа, нужно знать, что лаборатории могут работать на разных установках, применять различные методы проведения анализа и отличающиеся реагенты. Поэтому, в зависимости от лаборатории, могут незначительно различаться референсные значения – границы нормы.

В норме лейкоциты в крови у взрослых мужчин и женщин содержатся в количестве 4-9×10 Ед/л.

Содержание лейкоцитов в крови у ребенка в норме выше, чему взрослого. Например, у новорожденных этот показатель достигает 9,2-13,8х10 Ед/л. С взрослением ребенка уровень белых клеток в норме снижается. В возрасте трех лет нормальный диапазон составляет 6-17х10 Ед/л, а к десяти годам – уже 6,1-11,4 х10 Ед/л.

У беременных женщин уровень лейкоцитов тоже часто выше, чем у обычных взрослых людей. К концу третьего семестра повышенное содержание белых клеток у них считается нормой. Это объясняется возросшей нагрузкой на организм.

У пожилых людей производство лейкоцитов может снижаться на 2-3%, а их активность и защитные функции сокращаются почти в два раза. Это одна из причин, почему у людей в возрасте ослаблен иммунитет.

Отклонение уровня лейкоцитов в ту или иную сторону от нормы свидетельствует о проблемах со здоровьем. При этом важно знать не только показатель белых телец в крови пациента в общем (суммарное количество), но и каждого вида этих клеток по отдельности.

Лейкоцитарная формула у здорового взрослого человека выглядит следующим образом:

  • нейтрофилы: палочкоядерные – 1-5%, сегментоядерные – 40-70%;
  • лимфоциты – 20-45%;
  • моноциты – 3-8%;
  • эозинофилы – 1-5%;
  • базофилы – 0-1%.

Повышенные лейкоциты в крови

Лейкоцитоз возникает как следствие патологических процессов. При вторжении в организм агрессоров он выбрасывает в кровь большое количество белых клеток для борьбы с угрозой.

Лейкоцитоз может наблюдаться при следующих патологических процессах:

  • инфекционных заболеваниях любой природы (в том числе – при заражении вирусами и при гнойных инфекциях);
  • на фоне хронических воспалительных процессов;
  • при некоторых онкологических заболеваниях;
  • при аллергических реакциях;
  • при наличии паразитов в организме;
  • в ситуациях, когда нарушен защитный барьер кожи (при масштабных ожогах и обморожениях).

Есть ряд состояний, не связанных с заболеваниями, но при которых тоже повышается уровень лейкоцитов в крови. Речь идет про сильные стрессы, курение и строгие диеты. Также существует несколько физиологических состояний, естественным образом вызывающих повышенные показатели. Как мы рассказали выше, у беременных лейкоциты повышаются ближе к родам. Показатель повышается сразу после еды и приходит в норму через несколько часов – поэтому важно сдавать кровь минимум через 5 часов после приема пищи.

Баня или сауна и активная физическая нагрузка перед анализом тоже могут поднять уровень лейкоцитов.

Чтобы получить достоверный результат, общий анализ крови необходимо сдавать строго в спокойном состоянии натощак.

Пониженные лейкоциты в крови

Состояние, характеризующееся пониженным уровнем белых телец в крови, называется лейкопения. Довольно часто она носит временный характер, однако если показатель стабильно низок, это может свидетельствовать о серьезных патологиях.

Пониженный уровень лейкоцитов в крови может быть связан со следующими причинами:

  • поражениями костного мозга (например – радиоактивным излучением), при которых он не в состоянии производить необходимое количество белых клеток;
  • нарушениями в циркуляции крови;
  • слишком быстрым распадом лейкоцитов;
  • последствиями химиотерапии;
  • аутоиммунными и редкими наследственными заболеваниями;
  • приемом некоторых препаратов;
  • строгими диетами.

Чтобы восстановить нормальное значение лейкоцитов, необходимо обнаружить первичную причину патологии.

Как расшифровать лейкоцитарную формулу?

Лейкоцитарная формула, микроскопия лейкоцитов, пять фракций лейкоцитов, дифференцировка лейкоцитов — в назначениях врача можно встретить много названий одного и того же. Где ее найти и как расшифровать?

Что такое лейкоциты?

Лейкоциты (белые клетки крови) — это большая группа клеток крови. Их основная цель — защита организма от инфекций. Все лейкоциты — это часть иммунитета, они участвуют в аллергических, аутоиммунных, опухолевых процессах. Каждый тип лейкоцитов выполняет свою роль и важен для организма.

Общий анализ крови без лейкоцитарной формулы говорит только об общем содержании лейкоцитов и не позволяет выявить за счет какого типа лейкоцитов идет повышение (лейкоцитоз) или снижение (лейкопения) белых клеток крови. Лейкоцитарная формула определяет пять типов лейкоцитов и оценивается в развернутом общем анализе крови. Чтобы расшифровать лейкоцитарную формулу нужно оценить содержание каждого типа лейкоцитов и их соотношение между собой.

Лейкоцитарную формулу подсчитывает автоматический анализатор крови. Принимая содержание всех лейкоцитов за 100%, он выдает процент (%) содержания каждого типа белых клеток крови. Также автоматически измеряет их содержание в объеме крови (на литр). Иногда требуется “ручной подсчет” и визуальная оценка мазка крови под микроскопом. Например, когда лейкоцитарная формула изменена, есть странные или незрелые клетки, есть признаки анемии или снижения тромбоцитов в общем анализе крови. В этом случае можно увидеть только процентное соотношение лейкоцитарной формулы.

Гранулоциты — ударные силы

Самая большая часть лейкоцитов представлена клетками гранулоцитами. Свое название они получили из-за наличия включений (гранул). Гранулы содержат химические иммунные вещества. В лейкоцитарной формуле можно увидеть три вида гранулоцитов: нейтрофилы, эозинофилы, базофилы. Они различаются особенностями строения ядра и окраски гранул разными красителями. Гранулоциты важны в развитии воспаления и иммунной защите организма. Они способны к поглощению и перевариванию белков и химических веществ. Все гранулоциты созревают в костном мозге, сохраняя там запас зрелых клеток на 3-4 дня. В крови гранулоциты циркулируют не больше 6 часов, уходя в ткани, где и выполняют свою функцию.

Нейтрофилы составляют наибольшее количество циркулирующих в крови лейкоцитов. Ежедневно в кровоток поступает 10 10 нейтрофилов. Нейтрофилез (увеличение количества нейтрофилов в крови) — показатель бактериальной инфекции. Чем тяжелее инфекция, тем больше нейтрофилов выходит на борьбу. Из-за их низкой продолжительности жизни (около 4-х дней) в кровь начинают поступать более юные, еще не созревшие формы клеток (палочкоядерные, метамиелоциты и другие). Врачи называют это “сдвигом лейкоцитарной формулы влево”. Когда нейтрофилов в крови очень мало (нейтропения), организм не защищен от инфекций.

Эозинофилы в крови составляют не более 5% от общего количества лейкоцитов. Их концентрация колеблется в течение суток из-за воздействия гормонов надпочечников. Утром она максимальная. Накапливаются они в подслизистом слое желудочно-кишечного тракта. Эозинофилия (повышение эозинофлов в крови) возникает при паразитарных инфекциях, аллергических и аутоиммунных процессах.

Базофилы составляют наименьшее количество лейкоцитов в крови (менее 1%) и участвуют в аллергических реакциях, выделяя гистамин. Это вещество виновно в спазме бронхов, зуде, отеке, покраснении. В зависимости от того, куда базофилы попали, будут проявления аллергических реакций: приступ бронхиальной астмы, сыпь на коже, крапивница, отек Квинке (отек гортани).

Моноциты — тканевые охотники

Второе звено лейкоцитов — моноциты. В костном мозге, образовавшись за 5 дней, они не формируют запас. В крови моноциты составляют около 10% массы лейкоцитов, быстро уходя в ткани. Тканевые макрофаги, а именно так уже будут называться моноциты, преимущественно содержатся в печени, селезенке, легких. Их продолжительность жизни очень большая (60 дней). Они главные охотники иммунной системы, т.к. поглощают и перерабатывают тысячи чужеродных белков, делая из них доступные иммунным клеткам антигены.

Моноцитоз (повышение моноцитов в крови) связан с хроническими инфекциями, а также с инфекциями, возбудители которых прячутся в клетках организма (вирусы, хламидии, микоплазмы).

Лимфоциты — надежные защитники

Переработанные моноцитами-макрофагами и другими иммунными клетками антигены привлекают лимфоциты. Лимфоциты обеспечивают приобретенный иммунитет, производя антитела и клетки-памяти для защиты от повторной инфекции.

Лимфоциты образуются в костном мозге, циркулируют как в крови, так и в лимфатической системе. Важными органами созревания клеток являются тимус (вилочковая железа) и лимфоузлы. Лимфоциты выполняют разную иммунную работу, представляя вторую по численности группу лейкоцитов. Есть особенное исследование крови (иммунофенотипирование) позволяющее определить разные виды лимфоцитов. Это бывает важно при заболеваниях иммунной системы, ВИЧ-инфекции и др.

В лейкоцитарной формуле важны как повышение лимфоцитов (лимфоцитоз) — больше характерен для вирусных инфекций, так и лимфопения (снижение их количества). Нехватка лимфоцитов снижает защитные силы организма и наблюдается при иммунодефицитах (в том числе ВИЧ-инфекции).

В лаборатории Lab4U можно сдать со скидкой 50%:

Лейкоцитарная формула (с обязательной микроскопией мазка крови)

Лейкоцитарная формула (с обязательной микроскопией мазка крови) – подсчет количества общего количества и разных видов лейкоцитов, а также изучение их морфологических особенностей посредством микроскопии мазка периферической крови.

Leukocyte Differential Count, WBC Count Differential, Diff, Blood Differential, Differential Blood Count, White Blood Cell Differential.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную, капиллярную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Лейкоциты – это гетерогенная популяция ядросодержащих клеток крови, которые являются важнейшей частью иммунной системы человека и играют роль в процессах воспаления, аллергии и противоопухолевой защиты. Выделяют пять типов лейкоцитов, каждый из которых выполняет свои специфические функции: три вида гранулоцитов (эозинофилы, базофилы, нейтрофилы), моноциты и лимфоциты. Изучение лейкоцитарной формулы в мазке периферической крови представляет собой подсчет количества разных видов лейкоцитов и оценку их морфологических свойств. Для исследования может использоваться как венозная, так и капиллярная кровь.

Окраска мазка крови специальными красителями позволяет различать клетки и внутриклеточные структуры, кроме того, разные виды лейкоцитов неодинаково восприимчивы к некоторым красителям и окрашиваются по-разному, что вместе с различиями в их морфологических свойствах (форма ядра, размеры и наличие внутриклеточных гранул) позволяет дифференцировать основные виды лейкоцитов при изучении мазка с помощью микроскопа. Традиционно подсчет проводят на сто клеток и полученные цифры записывают в процентах. Зная общее количество лейкоцитов, проценты можно пересчитать в абсолютные значения, которые гораздо более объективно отражают состояние лейкоцитарной популяции.

Гранулоциты называются так потому, что содержат в своей цитоплазме гранулы, в которых содержатся биологически активные вещества, необходимые для выполнения лейкоцитами своих защитных функций. Выделяют три типа гранулоцитов:

  • Зрелые нейтрофилы имеют сегментированное на 4-5 долек ядро и гранулы, которое при окраске по Романовскому – Гимзе окрашиваются в фиолетовый цвет. Сегментоядерные нейтрофилы составляют основную часть лейкоцитов периферической крови. В намного меньшем количестве в крови могут встречаться нейтрофилы предыдущей стадии созревания – палочкоядерные (с ещё не разделенным на дольки ядром). Клетки более ранних этапов созревания (метамиелоциты, миелоциты и другие) могут появляться в мазке крови в исключительных случаях – например, при тяжелых инфекционных заболеваниях, когда костный мозг выбрасывает на борьбу с инфекцией еще не созревшие клетки (это называется сдвигом лейкоцитарной формулы влево), а также при хроническом миелолейкозе.
  • Эозинофилы участвуют в противопаразитарном иммунитете и развитии аллергических реакций. В их гранулах, которые окрашиваются в оранжево-розовый цвет, содержатся медиаторы аллергии и воспаления. Эозинофилы отличаются от нейтрофилов также по строению ядра – оно у них двудольчатое.
  • Базофилы – гранулоциты, которые принимают активное участие в аллергических реакциях немедленного типа. Они имеют S-образное несегментированное ядро, которое нередко не видно из-за крупных гранул интенсивного синего цвета, содержащих медиаторы аллергии.
  • Лимфоциты – клетки с крупным ядром, практически лишенные цитоплазмы. При окраске по Романовскому – Гимзе их ядро окрашивается в интенсивный пурпурно-фиолетовый цвет, а цитоплазма в сине-голубой. Лимфоциты участвуют в более сложных реакциях иммунитета, связанных с узнаванием своих и чужих антигенов, выработкой антител. Существует три класса лимфоцитов: Т-лимфоциты, В-лимфоциты и NK-клетки (“натуральные киллеры”), однако стандартная окраска не позволяет их различать, для этого используются более сложные в техническом отношении методы (например, иммунофенотипирование).
  • Моноциты – относительно крупные лейкоциты, содержащие несегментированное бобовидное ядро и, в отличие от лимфоцитов, большое количество цитоплазмы. Ядро при окраске по Романовскому – Гимзе приобретает пурпурно-красный цвет, а цитоплазма – мутный голубовато-серый. Основная функция моноцитов – фагоцитоз, то есть поглощение и переваривание микроорганизмов, собственных отмирающих клеток и т.п.

Вышеперечисленные типы лейкоцитов встречаются в мазке периферической крови в норме. При некоторых заболевания в кровь из костного мозга могут выходить клетки, которых в норме в мазке быть не должно: например, бласты – морфологический субстрат острого лейкоза. В заключении к исследованию обязательно указывается количество и по возможности морфологические особенности атипичных клеток.

Помимо подсчета количества клеток, врач лабораторной диагностики при микроскопии мазка крови отмечает изменения морфологии лейкоцитов:

  • Токсогенная зернистость нейтрофилов – внутри клеток присутствуют темные крупные грубые гранулы, которые образуются в результате коагуляции (“сваривания”) белка цитоплазмы под влиянием продуктов интоксикации.
  • Вакуолизация цитоплазмы – также обусловлена тяжелой интоксикацией, под влиянием которой в клетке возникает жировая дистрофия, а при фиксации мазка спиртом капельки жира растворяются и клетки приобретают характерный вид.
  • Тельца Князькова – Деле – крупные бледно-голубые участки цитоплазмы нейтрофилов, свободные от специфических гранул. Также встречаются при воспалительных заболеваниях, сепсисе.
  • Гиперсегментация ядер нейтрофилов – более пяти сегментов в ядре сегментоядерного нейтрофила. Может быть врождённой особенностью (в таком случае не имеет клинического значения), а следствием дефицита витамина В12 или фолиевой кислоты.
  • Аномалия лейкоцитов Пельгера – врождённое нарушение созревания нейтрофилов, проявляющееся уменьшением сегментации их ядер. Зрелые нейтрофилы содержат несегментированное или двухсегментное ядро. Это не сопровождается нарушением физиологических свойств нейтрофилов.
  • Тени Боткина – Гумпрехта – полуразрушенные ядра лейкоцитов с остатками ядрышек, получаются в процессе приготовления мазка из опухолевых клеток при хроническом лимфолейкозе.

Для чего используется исследование?

  • Для определения количества отдельных видов лейкоцитов и их соотношения между собой, оценки морфологических признаков лейкоцитов.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на инфекционное заболевание, а также на патологию костномозгового кроветворения.
  • При отклонениях количества лейкоцитов от референсных пределов по данным исследования крови, выполненного на гематологическом анализаторе.

Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева, нормы показателей и отклонения

Камера Горяева – это приспособление для измерения числа клеток и частиц в определённом объёме жидкости (кровь, моча), состоящее из специального толстого предметного и покровного стёкла.

Предметное стекло имеет углубленную площадку посередине, на которую нанесена сетка из 225 больших квадратов. Из этих квадратов 25 равномерно разделены на 16 меньших квадратов. Благодаря такому объёму сетки подсчёт выполняется точнее, нежели в других ручных счётных устройствах.

  1. Обслуживание камеры
  2. Определение лейкоцитов в крови
  3. Методика подсчёта лейкоцитов
  4. Норма лейкоцитов и отклонения
  5. Лейкоцитарная формула
  6. Методика подсчёта лейкоцитов в моче
  7. Сбор мочи
  8. Методика расчета

Обслуживание камеры

После использования инструмента предметное стекло дезинфицируют путём погружения в 4% раствор формалина на час или в 70% раствор этилового спирта на полчаса. После этого камеру тщательно промывают дистиллированной водой. Излишек жидкости убирают мягкой салфеткой. Стоит обратить внимание на то, что камеру нельзя протирать ватным тампоном из-за цепляющихся к ней волокон. Хранится стекло в сухом месте.

Во время использования камеры в подсчитываются те ФЭ, которые располагаются внутри квадрата сетки и на верхней и левой линии его периметра. При этом частицы, касающиеся правой и нижней линии периметра во время расчёта данной клетки не включаются.

Определение лейкоцитов в крови

Методика подсчёта лейкоцитов

Подсчёт количества лейкоцитов начинается с разведения крови в 3-5% растворе этановой кислоты с метиловой синью в 20 раз. Рабочий материал перед применением протирают марлей насухо.

Покровное стекло нужно протереть до возникновения цветных колец Ньютона. Далее, камеру заполняют разведённой кровью, при этом первые две капли выпускают на фильтровальную бумагу. Жидкость попадает в камеру благодаря капиллярному свойству воды. Важно проследить, чтобы в желобки при заполнении ничего не затекало. Если это произошло, жидкость аккуратно убирают фильтровальной бумагой. Затем оставляют сетку в покое на минуту, ожидая, пока ФЭ остановят своё движение.

Подсчёт лейкоцитов осуществляется в пределах ста больших квадратов при малом увеличении, то есть при окуляре 10х и объективе 8х, по правилу Егорова. Полученная цифра используется в формуле.

Х = (n × 250 × 20) / 100 или Х = n × 50

Х – количество лейкоцитов.

n – число, полученное в результате подсчёта в камере.

Количество лейкоцитов определяют, принимая во внимание число больших квадратов сетки – 100 и разведение крови – 20.

Норма лейкоцитов и отклонения

Норма лейкоцитов у людей составляет 4,0 – 9,0 × 10⁹/л. Или, по-другому, в 1 кубическом мм крови располагается примерно 6000 белых кровяных клеток.

На отклонения от нормы могут влиять внешние физиологические факторы:

  • приём пищи перед сдачей крови,
  • стресс,
  • беременность или менструация у женщин,
  • переохлаждение или перегрев,
  • большая физическая нагрузка перед сдачей анализов.

Если количество белых кровяных клеток превышает 9,0 × 10⁹/л (повышены лейкоциты), такое состояние называется лейкоцитозом. Лесбиянки часто используют в сексе разные подручные средства. Переходи по ссылке, чтобы посмотреть видео домашний страпон . Здесь есть ненасытные нимфоманки, которые кончают много раз от куни, а потом трахаются со страпоном, чтобы получить еще больше оргазмов . Подобную картину можно увидеть при злокачественных заболеваниях крови, инфекциях, поражениях радиацией и отравлениях.

Лекарственные препараты тоже способны увеличить количество лейкоцитов. Некроз тканей, обильные кровотечения, в том числе в результате операций, почечная кома, болезни сердца – всё это может привести лейкоцитозу.

Падение количества лейкоцитов ниже 3,9 × 10⁹/л называется лейкопенией. Однако у некоторых людей фиксируется постоянное число лейкоцитов в количестве 3,5 × 10⁹/л. Принято считать, что у таких людей сохраняется резерв этих клеток в тканях в 50 раз больше, нежели в крови. Еще встречается функциональная лейкопения после введения анальгетиков, сульфаниламидов и других лекарственных препаратов, после долгой мышечной работы, в результате поражения инфекциями и вирусами (тиф, грипп, корь).

Лейкоцитарная формула

Все виды лейкоцитов составляют лейкоцитарную формулу. По ней можно выявить определённые патологии. Нормы формулы меняются в зависимости от возраста и периода жизни человека. Сдвиг хорошо заметен у женщин во время беременности или после родов.

Применяются разные способы подсчёта соотношения видов этих клеток, но все они связаны с тем, что более тяжелые клетки (базофилы, например) располагаются ближе к краю мазка, а лимфоциты, как легкие клетки, остаются в середине.

  • Метод Филипченко. В данном способе подсчёт осуществляется по поперечной прямой границы одного конца к другому. Мазок при этом мысленно разделяют на три части.
  • Метод Шиллинга. Лейкоциты подсчитывают в четырех участках мазка.

Полученные данные записываются в таблицу. Индивидуально количество каждого вида белых клеток крови высчитывается по формулам. Отмечаются те элементы, которые попали в поле зрения. Счёт ведётся до того, момента, пока сумма всех подсчитанных клеток не составит 100.

Методика подсчёта лейкоцитов в моче

В моче подсчитывается количество лейкоцитов в камере Горяева по Нечипоренко. Этот анализ нужен для мониторинга заболеваний почек. Периодическое исследование мочи помогает проследить за правильностью лечения и эффективностью назначенной терапии.

Сбор мочи

В изучение идёт только первая утренняя моча в середине мочеиспускания. Для пациента важно следовать основным правилам сбора этого биоматериала. Специальной дополнительной подготовки для исследования не требуется.

Методика расчета

10 мл свежесобранной мочи центрифугируют в течение трёх минут при 2,5 тыс. оборотов в минуту. Перед этим необходимо проследить, чтобы моча, во избежание частичного распада клеток, имела слабокислую реакцию.

При помощи пипетки с узким оттянутым концом убирают верхний слой. В пробирке оставляют от 0,5 мл мочи до 1 мл в зависимости от объёма осадка.

Осадок аккуратно перемешивают с надосадочной жидкостью. Полученным раствором заполняют счётную камеру Горяева по схожему принципу, что используется при подсчёте ФЭ крови. Камеру оставляют в покое от 3 до 5 минут.

Лейкоциты необходимо подсчитать в больших квадратах по всей сетке с окуляром 7х и объективом 40х.

Полученная цифра используется в формуле:

Х = (а/0,9) × (1000/V)

Х – число лейкоцитов в 1 мл мочи.

а – подсчитанное количество, делённое на объём камеры в 1 мкл осадка мочи.

v – Количество мочи, взятой для исследования.

1000 – количество осадка.

Это важно! Норма лейкоцитов: в 1 мл мочи не более 2 × 10³ белых кровяных клеток.

Лейкоцитарная формула крови: о чем могут сказать результаты анализа?

Лейкоциты — это важнейшие элементы крови, которые, помимо прочего, обеспечивают защиту организма от различных вредных частиц, поглощая и обезвреживая чужеродные микроорганизмы. Поэтому, оценивая количество различных видов лейкоцитов, можно обнаружить патологический процесс. Для комплексной диагностики состояния лейкоцитов в крови существует специальный анализ — лейкоцитарная формула (лейкоформула). В статье поговорим о том, зачем нужен этот анализ, как проводится и что показывает?

Показатели лейкоформулы: норма содержания

Лейкоцитарная формула представляет собой соотношение нескольких видов лейкоцитов [1] . Часто исследование назначают вместе с общиманализом крови. Нейтрофилы, базофилы, эозинофилы, моноциты, лимфоциты — все эти виды белых кровяных телец и являются объектом исследования. Рассмотрим подробнее каждую из составляющих анализа.

Нейтрофилы служат для обеспечения безопасности организма. Они способны распознавать вредоносные бактерии, захватывая и уничтожая их. Наличие базофилов в крови обусловливает появление различных аллергических реакций [2] — эти клетки не позволяют вредным ядам и токсинам распространяться по всей кровеносной системе. Эозинофилы участвуют в развитии аллергических реакций, защищают нас от всевозможных паразитов, обеспечивая противопаразитарный иммунитет [3] . Функции моноцитов совпадают с функциями нейтрофилов с тем лишь отличием, что фагоцитарная способность первых частиц выше, к тому же они не только устраняют вредные микроорганизмы, но и поглощают погибшие лейкоциты, очищая кровь, тем самым давая тканям возможность регенерироваться. Лимфоциты способны распознавать, уничтожать и запоминать различные антигены, обеспечивая противовирусный и противоопухолевый иммунитет.

Общее количество лейкоцитов в крови у здорового человека приведено в таблице ниже. Отметим, что референтные значения (границы нормы) могут варьироваться в зависимости от лаборатории.

Таблица. Концентрация лейкоцитов — референтные значения.

Возраст

Концентрация лейкоцитов
(× 10 9 /л)

Для того чтобы выяснить соотношение видов белых кровяных телец в крови, врач назначает в дополнение к общему анализу крови подсчет лейкоформулы.

Помимо общей лейкоцитарной формулы существуют так называемые лейкоцитарные индексы — исследование соотношений разных типов белых кровяных телец в крови [4] . Одним из наиболее распространенных является лейкоцитарный индекс интоксикации, он служит для определения тяжести воспалительного процесса, также существуют индексы аллергизации, иммунореактивности и другие.

Как проводится анализ крови на определение лейкоцитарной формулы

Использование лейкоцитарной формулы для однозначной диагностики заболеваний довольно затруднительно, ведь соотношение видов лейкоцитов при различных патологических процессах в организме часто схоже. Полученные данные обычно применяют для отслеживания динамики заболевания и уровня эффективности лечения.

Подготовка к взятию крови на анализ не слишком сложная: пациенту достаточно отказаться от приема пищи не менее чем за четыре часа до процедуры, а накануне лучше избегать серьезных физических и эмоциональных нагрузок.

Материалом для определения лейкоцитарной формулы служит венозная кровь. Обычно процедура сбора биоматериала вызывает лишь слабые или умеренные болевые ощущения. Каплю полученной крови переносят на стеклянную пластинку, чтобы с помощью микроскопа определить количество и соотношение лейкоцитов. Если клиника оснащена современным оборудованием, то подсчет частиц ведет специальный аппарат — анализатор, а необходимость человеческого вмешательства возникает лишь в том случае, если результат показал сильные отклонения от нормы или наличие аномальных частиц.

Скорость получения результата анализа зависит от учреждения, в котором проводят исследование, но чаще всего это занимает не более нескольких дней. Оценку полученных значений проводит лечащий врач.

Расшифровка анализа с лейкоцитарной формулой

Существует несколько критериев, по которым специалист оценивает состояние крови и соотношение лейкоцитов.

Сдвиг лейкоцитарной формулы влево и вправо

Исследование нейтрофилов в мазке крови имеет особое значение. Врач делает вывод о наличии или скорости развития патологии исходя не только из их количества. Не последнюю роль играет «возраст» клеток, в частности преобладание «молодых» форм нейтрофилов над «зрелыми» или наоборот. Сдвигом результат анализа называется потому, что запись формулы крови подчинена определенному порядку: сначала идет учет молодых форм нейтрофилов, а затем более зрелых клеток в порядке возрастания. Таким образом, при возникновении дисбаланса показатели сдвигаются в ту или иную сторону.

Увеличение количества «молодых» нейтрофилов означает сдвиг лейкоцитарной формулы влево и может говорить о наличии различных патологических процессов в организме. Он указывает на воспаление, некротические процессы в тканях, инфекционные заболевания, отравление пищей или газом, а также проявляется при приеме различных медикаментов. Но сдвиг лейкоформулы влево не обязательно свидетельствует о патологии: временный дисбаланс клеток может возникать после тяжелых физических нагрузок и довольно быстро приходит в норму.

Обратная ситуация, то есть сдвиг лейкоцитарной формулы вправо, означает преобладание зрелых нейтрофилов над молодыми [5] . Такое распределение белых кровяных телец свидетельствует, например, о лучевой болезни, недостатке витамина B12, а также о болезнях печени и почек [6] . Сдвиг вправо характерен для пациентов, в недавнем времени перенесших переливание крови.

Почему показатели крови повышены?

Увеличение числа нейтрофилов в крови может быть признаком множества заболеваний, а также различных специфических состояний пациента. Этот эффект можно наблюдать при возникновении инфекционных болезней, в том числе и грибковых (например, кандидоз), ревматизме, повышении уровня глюкозы в крови при диабете, наличии злокачественных новообразований, отравлениях свинцом или ртутью [7] . Также большое количество нейтрофилов в крови наблюдается после тяжелых эмоциональных, физических, болевых нагрузок, а также под влиянием экстремально низких или высоких температур.

Превышение нормы лимфоцитов служит свидетельством наличия инфекционного заболевания (особенно вирусной природы), патологий крови, отравления свинцом или мышьяком, а также может быть последствием приема некоторых лекарственных препаратов [8,9] .

Во время острых инфекционных процессов и после перенесенных заболеваний в крови часто повышен уровень моноцитов. Также такое состояние крови характерно для людей с аутоиммунными заболеваниями, злокачественными опухолями и при отравлении тетрахлорэтаном и фосфором [10] .

Повышенный уровень эозинофилов наблюдается при аллергических заболеваниях, лекарственной аллергии (на антибиотики, противосудорожные препараты), паразитарной инвазии, онкологических заболеваниях, остром течении инфекционного заболевания [11] .

Грипп, ветряная оспа, туберкулез — эти заболевания способны вызывать повышение в крови количества базофилов. Помимо этого, концентрация белых кровяных телец данного типа возрастает при аллергических реакциях, язвенном колите, в результате гиперчувствительности к каким-либо пищевым продуктам, а также может указывать на наличие злокачественных новообразований в организме.

Почему показатели крови понижены?

Если концентрация нейтрофилов в крови существенно снижена, то врач может диагностировать одно из инфекционных заболеваний (брюшной тиф, туберкулез), повышенную чувствительность к медикаментам (антибиотикам, антигистаминным и противовоспалительным препаратам), мегалобластную анемию и анафилактический шок, а также заподозрить наличие дефектов иммунной системы.

Лимфоциты в лейкоцитарной формуле имеют сниженные показатели при иммунодефицитных состояниях, острых воспалительных процессах в организме, почечной недостаточности и аутоиммунных патологиях (системной красной волчанке, ревматоидном артрите). Кроме этого, уменьшение количества клеток свойственно людям, подвергшимся влиянию лучевой терапии.

Не менее серьезными причинами бывает вызвано снижение количества моноцитов в анализе крови. К причинам относятся онкогематологические заболевания, пиогенные инфекции и апластическая анемия. К тому же эффект в виде уменьшения количества моноцитов могут вызывать прием некоторых лекарственных препаратов и состояние сильного шока.

Самое начало воспаления можно диагностировать, если уровень эозинофилов значительно понижен. Также это случается при тяжелом течении гнойной инфекции, отравлении тяжелыми металлами, физическом перенапряжении.

Беременность, сильный стресс и период овуляции могут быть естественными причинами уменьшения количества базофилов в крови. Среди патологических причин — инфекционные заболевания и синдром Кушинга.

Лейкоцитарная формула помогает врачу диагностировать и оценивать эффективность лечения при аллергических реакциях, воспалительных процессах, различных болезнях крови и других патологиях. Имея такие преимущества, как высокая точность, объективность и воспроизводимость, анализ по праву может считаться одним из самых показательных методов исследования крови. Провести процедуру в домашних условиях невозможно, поэтому для определения соотношения разных видов лейкоцитов в крови, следует обратиться в медицинское учреждение.

Где можно проходить исследование лейкоцитарной формулы?

Дифференцированный подсчет лейкоцитов, или, проще говоря, анализ на лейкоформулу, — очень распространенный вид исследования. Проходить его можно во многих медучреждениях. Однако к выбору лаборатории стоит подходить ответственно. Лучше обращаться в проверенную компанию.

Пример такого медицинского учреждения — Лаборатория «Гемотест». Организация делает все возможное, чтобы предоставить пациентам точные результаты в максимально коротки сроки. Для этого, во-первых, применяется современное высокоточное оборудование. Во-вторых, многие процессы автоматизированы. В-третьих, в «Гемотест» работают квалифицированные специалисты с большим опытом проведения лабораторных исследований. Кроме того, для минимизации вероятности ошибки Лаборатория обеспечивает контроль качества на всех этапах исследования.

В «Гемотест» дифференцированный подсчет лейкоцитов проводится как в рамках общего (клинического) анализа крови, так и обособленно. Для этого принимается венозная кровь, однако у детей до семи лет возможно исследование капиллярной крови.

Лаборатория «Гемотест» предлагает широкий спектр анализов и исследований крови, мочи и других биологических материалов. Результаты во многих случаях можно получить уже на следующий день, а за дополнительную плату лейкоцитарная формула может быть готова уже через 12 часов. К слову, результаты исследований, проведенных в «Гемотест» принимают во всех клиниках РФ.

«Гемотест» привлекает своих клиентов не только высоким уровнем сервиса и точностью результатов, но и вполне приемлемыми ценами: стоимость услуг, как правило, соответствует среднерыночной.

P. S. «Гемотест» нередко предоставляет возможность сэкономить на медицинском обследовании: например, здесь действует 5%-ная скидка для людей младше 25 и старше 55 лет. Подробнее о действующих акциях и спецпредложениях можно узнать в соответствующем разделе сайта «Гемотест».

* Лицензия на осуществление медицинской деятельности № ЛО-50-01-011414 выдана 1 ноября 2019 года Министерством здравоохранения Московской области.

** Лицензия на осуществление медицинской деятельности № ЛО-23-01-014424 выдана 13 марта 2020 года Министерством здравоохранения Краснодарского края.

  • 1 https://ru.wikipedia.org/wiki/Лейкоциты#Виды_лейкоцитов
  • 2 https://ru.wikipedia.org/wiki/Базофилы#Функции
  • 3 https://ru.wikipedia.org/wiki/Эозинофилы#Функции
  • 4 Иванов Д.О., Шабалов Н.П., Шабалова Н.Н., Курзина Е.А., Костючек И.Н. Лейкоцитарные индексы клеточной реактивности как показатель наличия гипо- и гиперэргического вариантов неонатального сепсиса [Электронный ресурс] // Педиатрия и неонатология. — 2005. —URL: http://www.medlinks.ru/article.php?sid=22330 (дата обращения: 10.08.2021).
  • 5 https://ru.wikipedia.org/wiki/Лейкоцитарная_формула
  • 6 https://www.goldenmed.ru/blog/rezultaty-klinicheskogo-analiza-krovi/
  • 7,11 Николаева О. В., Кучерявченко М. А., Шутова Н. А. и соавт. Патофизиология системы крови. Часть II. Нарушения в системе лейкоцитов [Электронный ресурс] // Типография Мадрид. — 2016, 128 с. —URL: http://repo.knmu.edu.ua/bitstream/123456789/15513/1/Патофизиология%20системы%20крови.pdf (дата обращения: 10.08.2021).
  • 8 https://gb3str.ru/krov/limfotsity-povysheny-dopustimye-normy-i-prichiny-prevyshenij.html
  • 9 https://zabolevanija.net/limfotsity-povysheny/
  • 10 https://ru.wikipedia.org/wiki/Моноцитоз#Этиология

Вся информация, касающаяся здоровья и медицины, представлена исключительно в ознакомительных целях и не является поводом для самодиагностики или самолечения.

Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева, нормы показателей и отклонения

Принцип прямого счисления заключается в следующем: разбавить кровь в пипетке Potain (предусмотренной красным шариком для эритроцитов и белым — для лейкоцитов и тромбоцитов), при этом разбавляющая жидкость разная, соответственно виду клеток.

К разбавляющим жидкостям относятся:
а) для эритроцитов:
— хлорид натрия —1 г.
— сульфат натрия — 5 г.
— сублимат — 0,5 г.
— дистилированная вода — 200 мл.

б) для лейкоцитов:
— ледяная укусусная кислота — 2 мл.
— 1% метиленблау — 1 капля
— дистилированная вода — до 100 мл.

в) для тромбоцитов: — щавелевокислый аммоний — 1 г.
— Nа2ЭДТА — 0,01 г.
— дистилированная вода – 100 мл.

Пипетки Potain должны быть чистыми, совершенно сухими и цельными. До потребления пипетку испытать на проницаемость путем вдувания воздуха, после использования ее следует промыть проточной водой, с помощью трубки для вакуума, затем дистилированной водой. Через несколько дневные интервалы держать пипетку по 24 часа в серохроми-стой смеси, затем промывать тщательно проточной и дистилированной водой.

Высушивать в сушильном шкафу, при температуре 180°. Когда требуется срочное высушивание, пипетку промывать спиртом, а затем эфиром.

Разжижение крови. Набрать в пипетку кровь до деления 0,5, затем разбавляющую жидкость до деления 101 — в пипетку с красным шариком (для счисления эритроцитов) и до деления 11 в пипетку с белым шариком (для счисления лейкоцитов и тромбоцитов). Получаются следующие растворы: 1/200 для эритроцитов и 1/20 для лейкоцитов и тромбоцитов.

Счисление проводится в камере Бюркер-Тюрк или Горяева, к которой хорошо прикреплена чистая оригинальная пластинка.

Заполнение камеры для счисления. В течение 2 мин. хорошо встряхивать пипетку, затем отбросив первые 2—3 капли налить в камеру для счисления, на край пластинки, небольшое количество смеси, которое заполнит пространство в силу капиллярности. Нежелателен избыток смеси, поскольку он заполняет канавки гемоцитометра. Подождать выпадение форменных элементов крови (1—2 мин. в случае эритроцитов и лейкоцитов, 10—15 мин. во влажной камере — для тромбоцитов).

Счисление эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. Исследование проводить обычным оптическим устройством (объективом 10 х для лейкоцитов и 20 х или 40 х для эритроцитов и тромбоцитов, при этом конденсор располагается в среднем положении). Счисление проводить на следующих площадях;
— для эритроцитов — 5 квадратов (1/25 квадратиков по 1/400), т.е. 1/5 мм 2 ;
— для лейкоцитов — 4 квадрата, расположенные по углам камеры Бюркер-Тюрк, т.е. 4 мм 2 ;
— для тромбоцитов — одинаково с эритроцитами.

Из клеточных элементов, расположенных по линиям, отграничивающим площади счисления, подсчитывать лишь те из них, которые находятся вдоль одной вертикальной отграничивающей линии (напр. левой) и одной горизонтальной (напр. верхней).

Расчет эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. В целях определения числа форменных элементов на мм 2 учитывать площадь, вышину, разведение:
№ эритроцитов/мм 3 = № насчитанных эритроцитов х 5 х 10 х х 200 = № эритроцитов х 10 000;
№ лейкоцитов/мм 3 = № насчитанных лейкоцитов х 10 х 20 : 4 = = № насчитанных лейкоцитов х 50;
№ тромбоцитов/мм 3 = № насчитанных тромбоцитов х 5 х 10 х х 20 = число насчитанных тромбоцитов х 1000.

Отбор крови для подсчета тромбоцитов можно проводить также пипеткой Potain для эритроцитов, в таком случае отсасывать кровь до деления 1 а разбавляющую жидкость до деления 101. Получится разведение 1/100. Тромбоциты счислять с 200 квадратиков (1/2 мм2), полученную цифру умножить на 2000.

Поправка числа лейкоцитов в случае эритробластоза. Когда в крови находятся эритробласты число ядерных элементов, полученных при счислении, откоррегировать соответственно результату лейкоцитной формулы, по формуле: № лейкоцитов/мм3 = № ядерных элементов/мм3 х 100 / (100 + № эритробластов/100 лейкоцитов).

Количественное определение кровяных клеток основывается на их счислении на небольшом, предполагаемым однородным образце и обобщением результата на всю массу крови организма. Между полученным результатом и фактическим значением может возникнуть разница (погрешность), которая подвергается математическому расчету для определения степени точности каждого метода в отдельности.

Отклонения от строгого соблюдения технических указаний создают многочисленные причины погрешностей на протяжении всего процесса производимых в камере подсчетов. В том числе:
а) погрешности отбора,
б) ошибки аппаратуры,
в) техники,
г) неоднородного распределения в счислительной камере.

Когда проба отбирается одной пипеткой а счисление производится в одной камере погрешность определения числа эритроцитов составляет ±30%, лейкоцитов +20%, а тромбоцитов +30—40%. В то время как в отношении лейкоцитов и тромбоцитов такая погрешность незначительна, поскольку она меньше биологических колебаний, в отношении эритроцитов точность техники представляется неудовлетворительной.

В целях максимального снижения погрешности – и повышения точности счислений попимо строгого соблюдения технических указаний, пробы следует отбирать в 2 пипетки, а счисление проводить в 2 гемоцитометрах. В таких условиях наименьшая погрешность для эритроцитов уменьшается до +11%, для лейкоцитов и тромбоцитов до +16%. Однако электронное счисление представляет значительно большую степень точности. Так в отношении эритроцитов погрешность составляет +3%, для лейкоцитов+4%, а в отношении тромбоцитов +7,5%.

Тем не менее, счисление эритроцитов в камере остается наиболее сложный и в то же время наименее точный метод, причины, по которой его нельзя рассматривать как метод отбора. Единственным показанием к счислению эритроцитов является определение вида анемии.

При счислении тромбоцитов, независимо от метода, для проверки точности результата делается сопоставление с аспектом тромбоцитов на мазке крови.

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

Ссылка на основную публикацию