Условия для иммунофенотипирования лимфоцитов — для чего его проводят?

Оценка показателей клеточного иммунитета

Первым исследованием всегда является подсчет лейкоцитарной формулы (см. главу «Гематологические исследования»). Оцениваются как относительные, так и абсолютные значения количества клеток периферической крови.

Определение основных популяций (Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры) и субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперы, Т-ЦТЛ). Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы ВОЗ рекомендовано определение CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, соотношение CD4/CD8. Исследование позволяет определить относительное и абсолютное количество основных популяций лимфоцитов: Т-клетки – CD3, В-клетки – CD19, натуральные киллеры (NK) – CD3- CD16++56+, субпопуляции Т лимфоцитов (Т-хелперы CD3+ CD4+, Т-цитотоксические CD3+ CD8+ и их соотношение).

Метод исследования

Иммунофенотипирование лимфоцитов проводится c использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным ангинам на клетках иммунной системы, методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточных цитофлуориметрах.

Выбор зоны анализа лимфоцитов производится по дополнительному маркеру CD45, который представлен на поверхности всех лейкоцитов.

Условия взятия и хранения образцов

Венозная кровь, взятая из локтевой вены, утром, строго натощак, в вакуумную систему до указанной на пробирке метки. В качестве антикоагулянта используется К2ЭДТА. После взятия пробирку с образцом медленно переворачивают 8-10 раз для перемешивония крови с антикоагулянтом. Хранение и транспортировка строго при 18–23°С в вертикальном положении не более 24 ч.

Невыполнение этих условий приводит к некорректным результатам.

Интерпретация результатов

Т-лимфоциты (CD3+ клетки). Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при острых и хронических лимфолейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вырусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний.

Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, а именно о недостаточности клеточно-эффекторного звена иммунитета. Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии, злокачественных новообразованиях, после травмы, операций, инфаркта, при курении, приеме цитостатиков. Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.

В-лимфоциты (CD19+ клетки) Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, при новообразованиях иммунной системы, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.

Увеличение отмечается при аутоиммунных заболеваниях, хронических заболеваниях печени, циррозе, муковисцедозе, бронхиальной астме, паразитарных и грибковых инфекциях. Характерно в период реконвалесценции после перенесенных острых и хронических вирусных и бактериальных инфекций. Выраженное увеличение наблюдается при хроническом В-лимфолейкозе.

NK-лимфоциты с фенотипом CD3-CD16++56+ Натуральные киллеры (NK-клетки) – популяция больших гранулярных лимфоцитов. Они способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.

Увеличение количества NK-клеток связано с активацией антитрансплантационного иммунитета, в некоторых случаях отмечается при бронхиальной астме, встречается при вирусных заболеваниях, повышается при злокачественных новообразованиях и лейкозах, в периоде реконвалесценции.

Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах, паразитарных инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, облучении, лечении цитостатиками и кортикостероидами, стрессе, дефиците цинка.

Т-лимфоциты хелперы с фенотипом CD3+CD4+ Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.

Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD3+ CD8+ Повышение выявляется практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции. Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях.

Соотношение CD4+/CD8+ Исследование соотношения CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) рекомендовано только для мониторинга ВИЧ-инфекции и контроля эффективности АРВ терапии. Позволяет определить абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов, ЦТЛ и их соотношение.

Диапазон значений – 1,2–2,6. Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях. Является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).

Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.

Изменение соотношения может быть связано с количеством хелперов и ЦТЛ у данного пациента. Например, снижение количества CD4+ Т-клеток при острой пневмонии в начале заболевания ведет к снижению индекса, а ЦТЛ при этом могут не измениться.

Для дополнительного исследования и выявления изменений иммунной системы при патологиях требующих оценки наличия острого или хронического воспалительного процесса и степени его активности, рекомендуется включать подсчет количества активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+HLA-DR+ и ТNK–клеток с фенотипом CD3+CD16++56+.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+HLA-DR+ Маркер поздней активации, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания. При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением. Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.

ТNK-лимфоциты с фенотипом CD3+CD16++CD56+ Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности маркеры CD16++ CD 56+. Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.

Снижение их в периферической крови может наблюдаться при различных органоспецифических заболеваниях и системных аутоиммунных процессах. Увеличение отмечено при воспалительных заболеваниях разной этиологии, опухолевых процессах.

Исследование ранних и поздних маркеров активации Т-лимфоцитов (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) дополнительно назначают для оценки изменений ИС при острых и хронических заболеваниях, для диагностики, прогноза, мониторинга течения заболевания и проводимой терапии.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+CD25+, рецeптор к ИЛ2 CD25+ – маркер ранней активации. О функциональном состоянии Т-лимфоцитов (CD3+) свидетельствует количество экспрессирующих рецепторов к ИЛ2 (CD25+). При гиперактивных синдромах количество этих клеток возрастает (острые и хронические лимфолейкозы, тимома, отторжение трансплантата), кроме того, повышение их может свидетельствовать о ранней стадии воспалительного процесса. В периферической крови их можно выявить в первые три дня болезни. Снижение числа этих клеток может наблюдаться при врожденных иммунодефицитах, аутоиммунных процессах, ВИЧ-инфекции, грибковых и бактериальных инфекциях, ионизирующей радиации, старении, отравлении тяжелыми металлами.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD8+CD38+ Присутствие CD38+ на ЦТЛ лимфоцитах отмечено у пациентов с разными заболеваниями. Информативный показатель при ВИЧ-инфекции, ожоговой болезни. Увеличение числа ЦТЛ с фенотипом CD8+CD38+ наблюдается при хронических воспалительных процессах, онкологических и некоторых эндокринных заболеваниях. При проведении терапии показатель снижается.

Субпопуляция натуральных киллеров с фенотипом CD3- CD56+ Молекула CD56 – адгезивная молекула, широко представленная в нервной ткани. Кроме натуральных киллеров, экспрессируется на многих типах клеток, в том число на Т-лимфоцитах.

Увеличение данного показателя свидетельствуют о расширении активности специфического клона клеток киллеров, которые имеют меньшую цитолитическую активность, чем NK-клетки с фенотипом CD3- CD16+. Количество этой популяции возрастает при гематологических опухолях (ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, плазмоклеточная миелома, апластическая крупноклеточная лимфома), хронических заболеваниях, некоторых вырусных инфекциях.

Снижение отмечается при первичных иммунодефицитах, вирусных инфекциях, системных хронических заболеваниях, стрессе, лечении цитостатиками и кортикостероидами.

Рецептор CD95+ – один из рецепторов апоптоза. Апоптоз – сложный биологический процесс, необходимый для удаления из организма поврежденных, старых и инфицированных клеток. Рецептор CD95 экспрессируется на всех клетках иммунной системы. Он играет важную роль в контроле функционирования иммунной системы, так как является одним из рецепторов апоптоза. Его экспрессия на клетках определяет готовность клеток к апоптозу.

Снижение доли CD95+-лимфоцитов в крови пациентов свидетельствует о нарушении эффективности последнего этапа выбраковки дефектных и инфицированных собственных клеток, что может привести к рецидиву заболевания, хронизации патологического процесса, развитию аутоиммунных заболеваний и повышению вероятности опухолевой трансформации (к примеру, рака шейки матки при папилломотозной инфекции). Определение экспрессии CD95 имеет прогностическое значение при миело- и лимфопролифератиных заболеваниях.

Повышение интенсивности апоптоза наблюдается при вирусных заболеваниях, септических состояниях, при употреблении наркотических средств.

Активированные лимфоциты CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Тест отражает функциональное состояние Т-лимфоцитов и рекомендован для контроля за течением заболевания и контроля иммунотерапии при воспалительных заболеваниях разной этиологии.

Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD56

Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD56). Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, субпопуляции лимфоцитов.

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Иммунофенотипирование – характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:

Т-лимфоциты (CD3 + CD19 – );
Т-хелперы/индукторы (CD3 + CD4 + CD45 + );
Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3 + CD8 + CD45 + );
истинные “натуральные киллеры” (NK-клетки) (CD3 – CD56 + CD45 + );
В-лимфоциты (CD19 + CD3 – );

– но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток(Т-NK-клетки) (CD3 + CD56 + CD45 + );
NK-клетки, экспрессирующие α-цепь антигена CD8 (CD3 – СD8 + CD45 + ).

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

С инфекционным синдромом:

частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
урогенитальные инфекции;
грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
рецидивирующий герпес различной локализации;
гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
генерализованные инфекции: сепсис, гнойные менингиты.

С аллергическим (атопическим) синдромом:

атопический дерматит;
нейродермит;
экзема с инфекционным компонентом;
тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

С аутоиммунным синдромом:

ревматоидный артрит;
рассеянный склероз;
диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
аутоиммунный тиреоидит;
неспецифический язвенный колит.

С иммунопролиферативным синдромом:

опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Что означают результаты?

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов

Повышение показателя

Снижение показателя

Т-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD8 + CD45 + )

(CD3 – CD56 + CD45 + ), (CD3 – CD16 + CD45 + )

Т-“натуральные киллеры”, НК-Т

(CD3 + CD56 + CD45 + )

Не имеет диагностического значения.

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.

Результаты данного исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов.
Следует отметить, что оценка показателей в динамике существенно повышает клиническую значимость исследования.

Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) — CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56

Описание

Показания

Подготовка

Интерпретация

Описание исследования

Данный тест предназначен для иммунофенотипирования (оценки клеточного состава) лимфоцитов крови человека с целью определения его иммунного статуса – комплексного показателя работы иммунной системы. В качестве зондов используются моноклональные антитела, позволяющие охарактеризовать тип и функциональное состояние клеток по определенным наборам клеточных маркеров дифференциации (CD-антигенам).

Представители каждой субпопуляции лейкоцитов на разных стадиях содержат поверхностные и цитоплазматические антигены, характерные только для определенного вида и периода развития. Другими словами, CD-антигены – это антигены на поверхности клеток, по которым одни типы клеток отличаются от других. Существует стандартизация и дифференциация CD-антигенов, им присвоены определенные номера. Исследование проводится посредством метода проточной цитометрии. Он основан на выявлении фотометрических и флюоресцентных изменений отдельных клеток, проходящих вместе с жидкостью через луч монохоматического света. Метод позволяет с помощью флюоресцентно-меченых моноклональных антител посчитать количество лимфоцитов, относящихся к различным субтипам или находящихся на разных стадиях развития.

В рамках теста определяются следующие показатели:

Лимфоциты, абс.;
Т-лимфоциты (CD3+), %;
Т-лимфоциты (CD3+) кл/мкл;
Т-хелперы (CD3+CD4+), %;
Т-хелперы (CD3+CD4+) кл/мкл;
Т-цитотоксины (CD3+CD8+), %;
Т-цитотоксины (CD3+CD8+) кл/мкл;
Иммунорегуляторный индекс;
B-лимфоциты (CD19+), %;
B-лимфоциты (CD19+) кл/мкл;
EKK (CD3-CD16+CD56+), %;
EKK (CD3-CD16+CD56+) кл/мкл;
T-EK (CD3+CD16+CD56+), %.

Характеристика основных подтипов лейкоцитов, исследуемых в тесте:

1. Т-лимфоциты. Созревание клеток происходит в тимусе (вилочковой железе – важном органе иммунной системы, расположенном в верхнем отделе грудной клетки), откуда и пошло их название. В их задачу входит контроль работы В-лимфоцитов, отвечающих за гуморальный ответ иммунной системы – продукцию антител.

Т-хелперы – подвид Т-лимфоцитов. Поверхность данных клеток содержит структуры, способные распознавать антигены, обнаруженные вспомогательными клетками. Также они принимают участие в регуляции иммунного ответа посредством продукции цитокинов (небольших информационных молекул).

Роль цитотоксических Т-клеток состоит в распознавании фрагментов антигена на поверхности клетки-мишени, направлении своих гранул по направлению к обнаруженной мишени и высвобождении их содержимого при непосредственном контакте с ней.

2. В-лимфоциты. Вырабатываются данные клетки в лимфоидной системе (лимфоузлах и периферических органах). Поверхность этих клеток содержит антитела-рецепторы к антигенам. При контакте с антигенами происходит деление В-лимфоцитов и дифференциация их в вырабатывающие антитела плазматические клетки, которые обеспечивают гуморальный иммунитет.

3. ЕКК. Естественные (или натуральные) клетки-киллеры проявляют неиммунную цитотоксическую активность к неопластически измененным (опухолевым) клеткам-мишеням. ЕКК не относятся ни к моноцитам, ни к зрелымВ- или Т-лимфоцитам.

4. Т-ЕК проявляют естественную неиммунную киллерную активность и проявляют признаки Т-лимфоцитов.

Подготовка к исследованию

Кровь сдается строго натощак после воздержания от пищи в течение:

взрослые – 8-14 часов;
дети в возрасте 1-5 лет – 2-3 часа;
дети до года – 30-40 минут.

Можно пить негазированную воду. От употребления кофе, чая, соков следует воздержаться.

накануне обследования рекомендуется воздерживаться от физических и эмоциональных перегрузок;
за сутки до отбора пробы запрещено употребление алкогольных напитков, минимум за час – курение;
за сутки перед проведением обследования при наличии возможности и с разрешения лечащего врача исключить прием любых лекарственных препаратов;
непосредственно перед сдачей крови желательно 10-15 минут спокойно посидеть.

Забор крови не рекомендуется осуществлять после инструментального, ректального, мануального, рентгеновского, ультразвукового обследований, биопсии, кольпоскопии, гастроскопии, флюорографии, физиопроцедур, массажа, прочих диагностических и/или терапевтических манипуляций.

Показания к исследованию

а) при наличии затяжных, хронических, рецидивирующих инфекционных заболеваний:

часто повторяющихся ОРВИ;
хронических ЛОР-заболеваниях (отитах, гнойных синуситах, рецидивирующих воспалениях легких, бронхоплевропневмониях, периодических лимфаденитах);
бактериальных кожных и подкожных инфекциях(фурункулезе, флегмонах, пиодермиях, септических гранулемах, абсцессах, рецидивирующих гнойных воспалениях прямой кишки (парапроктитах));
инфекционных заболеваниях мочеполовой системы;
поражении грибком кожи и слизистых оболочек;
заражении паразитами;
рецидивирующем герпесе;
дисбактериозе;
гастроэнтеропатии, сопровождаемой хроническим поносом неясной этиологии;
присутствии длительное время без определенных причин субфебрильной температуры, лихорадки;
генерализированных инфекциях (например, гнойных менингитах, сепсисе);

b) при подозрении на приобретенный или обусловленный генетически иммунодефицит;

c) при аутоиммунных заболеваниях (характеризуются атакой иммунной системой на здоровые клетки собственного организма, что приводит к поражению здоровых тканей и развитию аутоиммунных воспалительных процессов):

рассеянном склерозе (образовании множественных рубцов на миелиновой оболочке нервных волокон головного и спинного мозга);
ревматоидном артрите (поражении суставов);
аутоиммунном тиреоидите (воспалении щитовидной железы);
неспецифическом язвенном колите (рецидивирующем воспалительном заболевании толстой кишки);
диффузных заболеваниях соединительной ткани (склеродермии, системной красной волчанке, дерматомиозите);

d) при аллергических заболеваниях:

атопическом дерматите;
нейродермите;
экземе с присутствием инфекции;
хроническом астматическом бронхите;
тяжелой атопической бронхиальной астме;
поллинозе (сезонной аллергической реакции на пыльцу);

e) при подозрении на СПИД;

f) при онкологических заболеваниях иммунной системы:

болезни Ходжкина (раке лимфатических узлов);
саркоме Капоши (многоочаговой сосудистой опухоли);
лимфоме (раке, поражающем лимфатическую систему организма);
остром и хроническом лимфолейкозе (болезни, характеризуемой прогрессирующим накоплением злокачественных В-лимфоцитов и поражающей на начальной стадии костный мозг, лимфоузлы, селезенку, периферическую кровь);

g) с целью обследования лиц перед и после трансплантации органов;

h) перед сложными операциями;

i) при осложнениях в послеоперационный период;

j) для осуществления контроля лечения, проводимого с применением цитостатиков (противоопухолевых препаратов), иммунодепрессантов (препаратов, искусственно угнетающих иммунную систему), иммуномодуляторов (препаратов, способных менять в любую сторону ответ иммунной системы организма).

Интерпретация исследования

Абсолютное количество клеток различных подтипов лимфоцитов измеряется в клетках в микролитре (кл/мкл), относительное – в процентах (%).

Иммунорегуляторный индекс – относительный показатель, рассчитываемый как соотношение CD4+ клеток (Т-хелперов) к CD8+ клеткам (Т-цитотоксическим клеткам).

Причиной изменения в составе субпопуляций лимфоцитов могут быть различные патологии, в частности, осложнения после оперативного вмешательства, трансплантации органов, при иммунодефиците, инфекциях, онкологических, аллергических, аутоиммунных заболеваниях. В таблице ниже отражены клинические ситуации, которые могут стать причиной изменения субпопуляционного состава лимфоцитов:

Субпопуляция лимфоцитов

Показатель повышается:

Показатель понижается:

Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+)

Естественные киллеры (CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+)

Т-естественные киллеры (CD3+CD56+CD45+)

Диагностического значения не имеет.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже (референсные значения указаны в графе «Нормы интерпретации»):

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата исследования: хх.хх.хххх

Исследование

Результат

Нормы интерпретации

Примечание

[287] Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) — CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56

Дата выдачи (дата исследования): хх.хх.хххх

Иммунная система Часть 8 Анализы

Помимо поражения вирусом иммунодефицита человека, вторичный иммунодефицит развивается после объемных оперативных вмешательств, обширных, тяжелых инфекций, на фоне терапии иммуноподавляющими или сильными противовоспалительными препаратами.

Исследования иммунитета помогают в оценке активности и стадии воспалительного, инфекционного и аллергического иммунного ответов, эффективности проводимой терапии. С этой целью они проводятся неоднократно.

Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой

Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой позволяет выявить множество заболеваний. Он отражает состояние гемопоэза – созревания и роста клеток крови в костном мозге. О состоянии иммунной системы говорят уровни белых клеток крови – лейкоцитов и лейкоцитарная формула. Наблюдение за лейкоцитарной формулой в динамике заболевания позволит выявить осложнения, распространение инфекции по организму, реакцию на лечение.

При бактериальных инфекциях можно увидеть повышение лейкоцитов и нейтрофилов с появлением их молодых форм в крови.

При вирусных инфекциях, наоборот, лейкоциты снижаются, а в лейкоцитарной формуле преобладают лимфоциты.

Преобладание тех или иных популяций в лейкоцитарной формуле помогает в диагностике причины воспаления. Например, при определенных инфекциях (например, инфекционный мононуклеоз) нарастают измененные моноциты, а при аллергических и паразитарных заболеваниях – эозинофилы.

Наличие совсем юных клеток (бластов) в крови признак чрезмерной активации костного мозга, а низкий уровень лейкоцитов и нейтрофилов без воспаления – его угнетения.

Лимфоциты, иммунофенотипирование

Выделяют разные популяции лимфоцитов, которые играют ключевую роль в направлении иммунного ответа – клеточный или гуморальный. Определение иммунного фенотипа лимфоцита возможно в специальном исследовании методом проточной цитофлюориметрии. Фенотип лимфоцитов зависит от особых рецепторов на их поверхности – кластеров дифференцировки CD. Наличие того или иного рецептора свидетельствует о принадлежности клетки к определенной популяции лимфоцитов.

Т-лимфоциты (CD3+) общие и их подтипы:

Т- клетки-киллеры (CD3+CD16+CD56+)

Естественные клетки-киллеры (CD3-CD16+CD56+)

Лимфоциты с маркером HLA-DR+

Иммунорегуляторный индекс (Т-хелперы/Т-цитотоксические)

Дополнительно исследуют другие CD маркеры лимфоцитов для определения их активности.

Оценка результата возможна только в совокупности с данными клинической картины и иммуномодулирующей терапии. Иммунофенотипирование лимфоцитов, как правило, проводят в динамике. Так, при ВИЧ-инфекции, поражающей Т-хелперы, снижение уровня CD3+CD4+ – клеток и иммунорегуляторного индекса (CD3+CD4+/CD3+CD8+) имеет плохой прогностический прогноз по течению заболевания.

Циркулирующие иммунные комплексы и система комплемента

Антигены связываются специфическими антителами с образованием иммунных комплексов. Последние активируют комплемент, способствуют удалению чужеродных антигенов. Если их слишком много циркулирует в крови, они откладываются в тканях, например почек, кожи, легких. Высокое содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) наблюдается при аутоиммунных, хронических воспалительных и инфекционных заболеваниях. С другой стороны, определение ЦИК в крови неспецифично, не отражает ни причину их нарастания, ни непосредственное влияние на органы.

Снижение уровней ЦИК на фоне лечения говорит о затихании воспалительного процесса и эффективности терапии.

Наиболее распространенными анализами на систему комплемента являются определение ключевых С3 и С4 компонентов. Показаниями для исследования – повторяющие инфекции, ревматические и аутоиммунные заболевания для выявления врожденных дефицитов комплемента, утяжеляющих течение этих болезней.

Исследуют уровни ЦИК, С3-компонент и С4-компонент комплемента.

Иммуноглобулины A, M, G, E

Общие иммуноглобулины – показатели гуморального иммунного ответа. Уровни IgM возрастают в острый период заболевания и при обострении хронической инфекции, IgG – в процессе выздоровления, IgA – в острый период заболевания, сохраняясь дольше IgM, отражают затяжное течение и поражение слизистых оболочек. Повышенные уровни IgE свидетельствуют об аллергическом воспалении.

Общие иммуноглобулины не объясняют причину инфекции, поэтому целесообразно смотреть специфические антитела к конкретным возбудителям. Основные показания для определения общих антител – это подозрение на врожденный иммунодефицит, связанный с гуморальным иммунитетом.

Интерфероновый статус и Интерлейкины

Исследования Интерфероновый статус, Интерлейкин-1бета, Интерлейкин-6, Интерлейкин-8, Интерлейкин-10, Фактор некроза опухоли-альфа и другие определяют уровни цитокинов – специфических маркеров иммунного ответа. Помогают в определении стадии заболевания, врожденных дефектов, онкологических заболеваний, активности воспалительного процесса и осложнений. Как правило, требуют динамического контроля для помощи в оценке клинической ситуации и эффективности лечения.

Фагоцитарная активность

Фагоцитарной активностью обладают нейтрофилы, моноциты-макрофаги и другие клетки. Фагоцитоз – это способность поглощать и переваривать антигены, вплоть до целых клеток. Он определяет возможности врожденного иммунитета и необходим для формирования приобретенного иммунитета. Оценка фагоцитарной активности клеток крови трудоемка и сложна. Используют такие тесты как оценка фагоцитоза бактерий с флюоресцентной меткой, тест по восстановлению нитросинего тетразолия.

Фагоцитарная активность повышается при бактериальных, аутоиммунных, аллергических заболеваниях.

Ее снижение наблюдается при врожденных дефектах фагоцитарной системы, хронических инфекциях.

Иммунограмма – это общее название всех исследований иммунного статуса. И в разных лабораториях включают разное сочетание анализов в зависимости от цели обследования. Для оценки клеточного иммунитета применяют исследование иммунофенотипов лимфоцитов. Для оценки гуморального иммунитета – общие иммуноглобулины, при необходимости дополняя их ЦИК, комплементом и белками острой фазы. Для оценки врожденного иммунитета больше подходят определения цитокинов в крови, фагоцитарная активность.

Условия для иммунофенотипирования лимфоцитов — для чего его проводят?

здоровым людям (взрослым и детям) для оценки индивидуальных показателей иммунограммы в стабильном, здоровом состоянии. Это необходимо знать для оценки иммунного статуса пациента при заболевании в сравнении с его границами нормальных показателей. Для каждого пациента более информативна именно индивидуальная норма, нежели показатели границ нормальных колебаний из стандартного бланка анализа. В этом аспекте как раз и повышается значимость наблюдений за изменениями иммунологических показателей в динамике.

пациентам (взрослым и детям), страдающим тем или иным заболеванием (как в стадии обострения, так и при хроническом течении), для возможности сделать вывод о наличии изменений в иммунном статусе, вызванных заболеванием. При обнаружении существенных отклонений иммунного статуса от нормы в двух и более показателях, даже при отсутствии симптомов болезни, пациент относится к группе повышенного риска развития иммунопатологии.

женщинам с привычным невынашиванием беременности, при бесплодии, в том числе неясного генеза, при многократных имплантационных потерях, как однократное самопроизвольное прерывание беременности, так и привычная потеря плода в естественном цикле и после применения ВРТ (ЭКО). Это позволяет выявить особенности иммунного статуса у женщин с такими проблемами и подобрать терапию при подготовке к беременности.

женщинам и мужчинам с рецидивирующими смешанными инфекциями урогенитального тракта для исключения нарушений в системном иммунитете и развитии вторичных иммунодефицитных состояний, которые часто становятся причиной хронизации инфекционных процессов и развития резистентности к общепринятой терапии

Основные показания к назначению анализа:

рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением (в том числе ВИЧ, гепатиты В и С, герпес, ВПЧ);

частые простудные заболевания (бронхиты, синуситы, отиты);

хронические тонзиллиты, гаймориты;

аллергические заболевания (крапивница, бронхиальная астма, атопический дерматит, поллиноз и др.);

подозрение на генетически обусловленный (первичный иммунодефицит, ПИД) или приобретённый иммунодефицит (вторичный иммунодефицит, ВИД);

подозрение на синдром приобретённого иммунодефицита (СПИД);

обследование реципиентов до и после трансплантации органов;

обследование пациентов перед серьёзными оперативными вмешательствами; осложнённое течение послеоперационного периода;

Возможные причины повышения и снижения показателя

Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при T-клеточных лейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вирусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний. Может повышаться при приёме биологически активных добавок, длительном приёме лекарственных препаратов (особенно монотерапии), интенсивном занятии спортом и при беременности.

Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета. Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии; вирусных, грибковых и паразитарных хронических инфекциях; аутоиммунных заболеваниях; доброкачественных и злокачественных новообразованиях; после травмы, операций, инфаркта, кровоизлияний, ожогов, стрессов; при курении, алкогольном циррозе печени, приеме цитостатиков. Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.

Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.

Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является однозначным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.

Повышение выявляется при острой фазе аллергии, при ряде Т-клеточных лимфом, практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции.

Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях, иммуносупрессивной терапии.

Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях (иммунной тромбоцитопении, тиреодите Хашимото, гемолитической и В12-дефицитной анемии, синдроме Гудпасчера, хроническом активном гепатите, системной красной волчанке, ревматоидном артрите, пузырчатке обыкновенной), остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.

Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных (особенно цитомегаловирусной инфекции и хроническом вирусном гепатите) и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, остром и хроническом стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях, сепсисе, гемофилии, малярии, шистосомозе, инфекционном мононуклеозе, кори, язвенном колите, перитоните, иммунодефиците с тимомой. Является однозначным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).

Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.

Истинные натуральные киллеры –

NK-клетки способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.

Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах, паразитарных и вирусных инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, облучении, лечении цитостатиками и кортикостероидами, хроническом стрессе, дефиците цинка.

Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток

Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.

Т-клетки активированные (CD3+HLA-DR+D45+)

Маркер поздней и длительной активации клеток, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания. При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением. Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.

В норме клетки с подобным фенотипом в кровотоке присутствуют в незначительном количестве. Они представляют собой высокодифференцированные клетки памяти

Условия для иммунофенотипирования лимфоцитов — для чего его проводят?

Аспиранту
Ординатору
Врачу
Пациенту
Донору
Контакты

Аспиранту
Ординатору
Врачу
Пациенту
Донору
Контакты

О Центре
- Дирекция
- Структура
- История
- Все руководители Центра
  - Богданов А. А. (Малиновский)
  - Богомолец А. А.
  - Багдасаров (Багдасарян) А. А.
  - Киселёв А. Е.
  - Гаврилов О. К.
  - Федотенков А. Г.
  - Воробьёв А. И.
  - Савченко В. Г.
- Они ковали Победу!
- Наши награды
- Выдающиеся гематологи и трансфузиологи, работавшие в Центре
- Официальная информация
- Печатные издания Центра
  - «Гематология и трансфузиология»
- Нормативные документы
- Политика конфиденциальности
- Вакансии
- Охрана труда
Наука
- Подразделения
- Клинические апробации
- Проведение испытаний лекарственных препаратов
- Результаты научной деятельности
  - Результаты НИР
  - Патенты и авторские свидетельства
  - Гранты и договоры
  - Информационно-аналитическая система результатов научной деятельности
- Научные мероприятия, конференции, конгрессы
  - Конференции
  - Конгрессы
- Диссертационные советы
  - Диссертационные советы на базе ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
  - Нормативные документы
  - Объявления о защите
  - Документы для защиты
  - Организация работы диссертационных советов в условиях ограничений, связанных с COVID-19
- Правила публикаций и электронные журналы
  - Правила для авторов публикаций
  - Электронные журналы
- Аттестация научных работников
- Конкурсы на замещение должностей научных сотрудников
Клиника
- Подразделения
- Практикующему врачу
  - Клинические рекомендации
  - Методические рекомендации по HLA-типированию доноров костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток
  - Российский реестр лекарственных препаратов, применяемых у больных с нарушениями порфиринового обмена
    - О реестре
  - Порядки оказания медицинской помощи
  - Стандарты медицинской помощи
- Пациенту
  - Правила записи на прием
  - Сведения о медицинских работниках
  - Порядок получения помощи пациентам с нарушениями свертывания крови
  - Высокотехнологичная медицинская помощь
  - Порядок получения талона-направления на высокотехнологичную медицинскую помощь
  - Правила и сроки госпитализации
  - Правила посещения пациентов стационара
  - Платные услуги
  - Правила пересылки биоматериалов для лабораторных исследований
  - Порядок сдачи биоматериала в патологоанатомическое отделение
  - Порядок сдачи иммунохимического анализа
  - Порядок направления биоматериала (моча) на диагностику острой порфирии
  - Правила подготовки к диагностическим исследованиям
  - Порядок исследования T-клеточного ответа на вирус SARS-CoV-2 методом ELISPOT
  - Истории пациентов
  - Территориальная программа государственных гарантий бесплатного оказания гражданам медицинской помощи
  - Правила внутреннего распорядка для пациентов и посетителей
  - Часто задаваемые вопросы
  - Порядок выдачи справок и медицинских заключений
  - Страховые компании, с которыми работает Центр
  - Оценка качества оказания медицинских услуг
  - Гематологический глоссарий
  - Памятка по получению копий документов и выписок
  - Видеоматериалы
Трансфузиология и донорство крови
- Подразделения
- Современная научно-практическая деятельность в трансфузиологии
- Донору
  - Зачем сдавать кровь
  - Кто может стать донором
  - Как стать донором
    - Процесс сдачи крови
    - Почетный донор России
    - Льготы для доноров
  - Виды донорства
    - Донорство цельной крови
    - Донорство плазмы
    - Донорство тромбоцитов
    - Донорство гемопоэтических стволовых клеток
  - Стать донором костного мозга
  - Что должен знать донор?
    - Питание донора
    - Периодичность донации
    - Безопасность донации
    - Противопоказания к донорству
    - Карантинизация плазмы
  - Справка о количестве кроводач, плазмодач
  - Адресное донорство
  - Использование донорской крови
  - Часто задаваемые вопросы
  - Словарь донора
  - Кодекс донора
  - Новости для доноров
  - Контакты
Организационно-методическая работа
- Подразделения
Телемедицина
Референс-центр
- Группа иммуногисто-химических и патоморфологических методов исследований
- Группа лучевых методов исследований
- Алгоритм направления результатов исследований на консультацию с использованием телемедицинских технологий
Образование
- Сведения об образовательной организации
- Аспирантура
- Ординатура
- Аккредитация специалистов
  - Методический аккредитационно-симуляционный центр
  - Первичная специализированная аккредитация
- Приемная комиссия
  - Приемная комиссия 2016
  - Приемная комиссия 2017
  - Приемная комиссия 2018
  - Приемная комиссия 2019
  - Приемная комиссия 2020
  - Приемная комиссия 2021
- Нормативные документы
- Электронная информационно-образовательная среда
  - Информационно-библиотечные ресурсы
  - Образовательный портал аспирантуры и ординатуры
  - Портал инновационного дополнительного образования
  - Образовательные мероприятия
- Дополнительное образование
  - Непрерывное медицинское образование
  - Дополнительное профессиональное образование
  - Повышение квалификации ППС медицинских вузов
Научно-производственная деятельность
- Подразделения
- Научная деятельность по разработке лекарственных препаратов
- Производимые лекарственные препараты
  - Информация по лекарственному препарату Агемфил A, фактор свертывания VIII
  - Информация по лекарственному препарату Агемфил B, фактор свертывания IX
Межрегиональное взаимодействие
- График выездных мероприятий на 2021 год
- График мероприятий с применением ТМ технологий на 2021 год
- Нормативные документы
- Отчет о выездных мероприятиях
Профсоюз
- Новости профсоюза
Проекты документов для обсуждения
- Проект
- Обсуждение в ФГБУ НМИЦ гематологии
Служба главного внештатного гематолога Российской Федерации
- Профильная комиссия
  - Новости
Новости
Отзывы
Для СМИ

Лаборатория иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга

Заведующий лабораторией — Гальцева Ирина Владимировна (на фото справа).

Лаборатория была организована 1 марта 2013 г.

Иммунофенотипирование клеток, осуществляемое с помощью проточной цитофлуориметрии, широко применяется в клинико-диагностических и научных исследованиях. Отличительной чертой данного анализа является возможность определения фенотипа единичных клеток. Метод основан на применении моноклональных антител к антигенам дифференцировки, сочетание которых позволяет выявлять разнообразные клеточные популяции. Совокупность антигенов на поверхности клетки называется иммунофенотипом. Проточная цитофлуориметрия за последние 20 лет стала неотъемлемым исследованием в диагностике различных гематологических заболеваний, в частности лимфом, лейкозов, плазмоклеточных неопластических заболеваний, пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ) и др. На основании данных об иммунофенотипе и анализе большого количества клеток проточная цитофлуориметрия позволяет находить крайне редко встречающиеся клеточные субпопуляции.

Коллектив лаборатории. Гальцева Ирина Владимировна (сидит) — заведующий лабораторией. Стоят: Капранов Н. М., Давыдова Ю. О.

Сотрудники лаборатории являются высококвалифицированными специалистами в области проточной цитофлуориметрии, прошли обучение не только в клинических центрах России, но и в зарубежных университетах и имеют сертификаты по основам проточной цитометрии. Прошли обучение в международной школе цитометрии в г. Женева (Швейцария) и получили сертификат, подтверждающий адекватность анализа и разрешающий проводить исследование ПНГ-клона (Россия, Америка). Также получили практический опыт работы по диагностике и анализу острых лейкозов и лимфом в Гентском университете в Бельгии. Сотрудники лаборатории регулярно посещают международные конференции и обмениваются знаниями с зарубежными и российскими коллегами.

Лаборатория тесно сотрудничает с научно-клиническими подразделениями НМИЦ гематологии. Основным направлением работы лаборатории является стандартизация и применение метода проточной цитофлуориметрии для диагностики минимальной остаточной болезни (МОБ) при таких заболеваниях, как множественная миелома, острые лимфобластные и миелобластные лейкозы.

В лаборатории осуществляют подсчёт гемопоэтических CD34-позитивных стволовых клеток на рутинной основе в образцах периферической крови, костного мозга и продуктах лейкоцитафереза согласно международному протоколу ISHAGE (International Society of Hematotherapy and Graft Engineering).

Врач КЛД Давыдова Юлия Олеговна.

Диагностика плазмоклеточных неоплазий и поиск МОБ при множественной миеломе проводится согласно последним мировым рекомендациям по стандартизации исследований, опубликованным в 2016 году (Stetler—Stevenson, Paiva, Rawstron). Мониторинг МОБ при острых В- и Т-линейных лимфобластных лейкозах проводится в рамках протоколов ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2016. Проводится оптимизация и отработка методики поиска МОБ при острых миелобластных лейкозах. Впервые в России в лаборатории начато применение и интеграция иммунофенотипического исследования в схему диагностики миелодиспластических синдромов. Данный анализ проводится в соответствии с европейскими рекомендациями сообщества LeukemiaNet.

Медицинский физик Капранов Николай Михайлович.

В лаборатории проводятся многочисленные исследования, которые ложатся в основу диссертационных работ врачей-гематологов и трансфузиологов. С участием сотрудников лаборатории опубликовано большое количество печатных работ и стендовые доклады на международных симпозиумах. В сферу научных интересов входят исследования субпопуляционого состава крови и костного мозга у больных после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, в частности Т-регуляторных клеток; изучение циркулирующих эндотелиальных клеток у больных после трансплантации; исследование экспрессии ангиотензин-превращающего фермента на мобилизованных стволовых клетках крови; изучение динамики ПНГ-клона у больных апластической анемией; проводится изучение элементов иммунологического синапса при лимфомах; фиксированных антитромбоцитарных антител у больных с множественными трансфузиями. На базе лаборатории проведено исследование активационных маркеров тромбоцитов в заготовленных при различных условиях тромбоконцентратах доноров, оценивается динамика изменения количества циркулирующих CD34+ клеток в периферической крови у пациентов после проведения спленэктомии, оцениваются различные свойства мультипотентных мезенхимных стромальных клеток, использующихся для профилактики реакции трансплантат против хозяина после трансплантации аллогенных стволовых клеток, оценивается динамика изменения субпопуляционного состава лимфоцитов крови у больных острыми В-лимфобластными лейкозами, получающих таргетную терапию и пациентов после выполнения трансплантации аллогенной почки.

Ключевые сотрудники

Давыдова Юлия Олеговна — врач клинической лабораторной диагностики.

Капранов Николай Михайлович — медицинский физик.

Исследование популяций лимфоцитов (Иммунограмма на проточном цитометре, клеточный иммунитет)

Краткое описание:
Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD-антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития.
Основные субпопуляции лимфоцитов, определяемые в стандартной иммунограмме:
• Т-лимфоциты (CD3+CD19-),
• Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+),
• Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3+CD8+CD45+),
• истинные натуральные “киллеры” (NK-клетки) (CD3-CD56+CD45+),
• В-лимфоциты (CD19+CD3-)

Синонимы (rus): Иммунограмма, иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии.
Синонимы (eng): Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Метод исследования: Проточная цитометрия.

Тип материала: Венозную кровь.

Тип пробирки: 2 вакуумные пробирки – с К3ЭДТА (цвет крышки: сиреневая)

Единица измерения: %, абс.число

Подготовка к исследованию:
• Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
• Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.
и с активатором свертывания крови (цвет крышки: красная с желтым кольцом)

Цена услуги: 3082 руб.

Срок выполнения: 3 рабочих дня, понедельник, четверг

Возраст % от общего количества
лимфоцитов Абсолютное количество
клеток х 10 9/л
СD3 + (Т-лимфоциты)
1-3 мес. 55 – 78 2,07 – 6,54
3 мес.- 1 год 45 – 79 2,28 – 6,45
1 – 2 года 53 – 81 1,46 – 5,44
2 – 6 лет 62 – 80 1,61 – 4,23
6 – 16 лет 66 – 76 1,40 – 2,0
> 16 лет 60 – 89 0,88- 2,40
CD3+CD4+ (Т-хелперы)
1-3 мес. 41 – 64 1,46 – 5,12
3 мес. – 1 год 36 – 61 1,69 – 4,60
1 – 2 года 31 – 54 1,02 – 3,60
2 – 6 лет 35 – 51 0,90 – 2,86
6 – 16 лет 33 – 41 0,70 – 1,10
> 16 лет 31 – 61 0,54- 1,46
CD3+CD8+ (Т-цитотоксические лимфоциты)
1-3 мес. 16 – 35 0,65 – 2,45
3 мес. – 1 год 16 – 34 0,72 – 2,49
1 – 2 года 16 – 38 0,57 – 2,23
2 – 6 лет 22 – 38 0,63 – 1,91
6 – 16 лет 27 – 35 0,60 – 0,90
> 16 лет 14 – 36 0,21 – 1,20
CD19+ (В-лимфоциты)
1 мес.-2 года 19 – 31 0,50 – 1,50
2 – 6 лет 21 – 28 0,70 – 1,30
6 – 16 лет 12 – 22 0,30 – 0,50
> 16 лет 5 – 19 0,10 – 0,48
CD3-CD16+CD56+ (ЕК-клетки)
1 – 4 мес. 2 – 14 0,040 – 0,915
4 мес. – 1 год 2 – 13 0,040 – 0,915
1 – 2 года 3 – 16 0,040 – 0,915
2 – 6 лет 4 – 23 0,096 – 1,33
6 – 12 лет 4 – 26 0,096 – 1,33
12 – 16 лет 6 – 27 0,10 – 0,50
> 16 лет 4 – 26 0,078 – 0,47
CD3+CD16+CD56+ (ЕКТ-клетки)
1 мес.- 16лет 0- 10 –
>16 лет 1-13 –
ИРИ (иммунорегуляторный индекс, соотношение CD3+CD4+ / CD3+CD8+
1-3 мес 1,30- 3,50
3-12 мес 1,20-3,50
1-2 года 1,00-3,00
2-6 лет 1,00-2,10
6-16 лет 1,10-1,40
>16 лет 1,00-3,50

Субпопуляция лимфоцитов Повышение показателя Снижение показателя

T-лимфоциты (CD3+CD19-) – Острые и хронические инфекции
– Гормональный дисбаланс
– Длительный прием лекарственных препаратов (особенно монотерапия)
– Прием биологически активных добавок
– Интенсивные занятия спортом
– Беременность
– T-клеточные лейкозы – Некоторые виды инфекций
– Иммунодефицитные состояния
– Алкогольный цирроз печени
– Карцинома печени
– Аутоиммунные за-болевания
– Прием иммуносупрессивных препаратов

T-хелперы (CD3+CD4+CD45+) – Ряд аутоиммунных заболеваний
– Гормональный дисбаланс
– Некоторые инфекции
– Отдельные T-клеточные инфекции
– Отравление солями бериллия – Иммунодефицитн. состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита)
– Алкогольная болезнь печени
– Аутоиммунные заболевания
– Прием иммуносупрессивных препаратов или прием стероидов

T-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+) – Некоторые вирусные инфекции
– Ряд T-клеточных лимфозов
– Наркоз
– Острая фаза аллергии
– Ряд аутоиммунных патологий – Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний
– Иммуносупрессивная терапия

B-лимфоциты (CD19+CD3-) – Ряд аутоиммунных патологий
– Стресс
– B-клеточные лимфомы
– Длительное воздействие формальдегида Гипореактивность, перераспределение B-лимфоцитов в очаги воспаления

Натуральные «киллеры» (CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+) – Фаза восстановления после вирусных инфекций (гепатит B, C)
– Ряд аутоиммунных заболеваний
– Онкологические заболевания
– Беременность
– Активация антитранспланационного иммунитета – Ряд инфекций
– Ряд аутоиммунных заболеваний
– Курение
– Иммуносупрессивная терапия и терапия стероидами